人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒廠家
小知識:影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點。
特點
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、節(jié)省實驗經(jīng)費。
試驗原理:
Glucagons試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Glucagons濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Glucagons和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Glucagons的濃度呈比例關(guān)系。
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒廠家試劑盒內(nèi)容及其配制
試劑盒成份(2-8℃保存) 96孔配置 48孔配置 配制
96/48人份酶標板 1塊板(96T) 半塊板(48T) 即用型
塑料膜板蓋 1塊 半塊 即用型
標準品:400pg/ml 1瓶(0.6ml) 1瓶(0.3ml) 按說明書進行稀釋
空白對照 1瓶(1.0ml) 1瓶(0.5ml) 即用型
標準品稀釋緩沖液 1瓶(5ml) 1瓶(2.5ml) 即用型
生物素標記的抗Glucagons抗體 1瓶(6ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
親和鏈酶素-HRP 1瓶(10ml) 1瓶(5.0ml) 即用型
洗滌緩沖液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml) 按說明書進行稀釋
底物A 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
底物B 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
終止液 1瓶(6.0ml) 1瓶(3.0ml) 即用型
標本稀釋液 1瓶(12ml) 1瓶(6.0ml) 即用型
自備材料
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒廠家操作注意事項
1. 試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
9. 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
1、 血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、 血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、 細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、 組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5、 保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA試劑盒廠家
核酸雜交漂洗液(低張力) · 核酸雜交后漂洗溶液 · 核酸雜交 · 500ml · 室溫,6個月 · 主要由SSC、曲拉通-100、滅菌水等組成,離子強度較低。
Acr-Bis(20%,19.6:0.4) · 配制丙烯酰胺凝膠(PAGE膠),包括SDS-PAGE膠等,可以用于蛋白或核酸的分離。丙烯酰胺:亞甲基雙丙烯酰胺溶液(20%Acr-Bis,19.6:0.4) · 蛋白電泳 · 100ml · 4℃,避光,3個月 · 主要由超純丙烯酰胺(acrylamide):亞甲基雙丙烯酰胺(bisacrylamide)組成,其比例為19.6:0.4。
Scott藍化液 · 蘇木素染色后藍化,尤其*用于Gill'sⅢ藍化蘇木素藍化。 · HE染色 · 500ml · 室溫,6個月 · 主要由硫酸鎂、碳酸氫鈉等組成。
Bouin's脫鈣液 · 組織脫鈣 · 脫鈣液 · 500ml · 室溫,避光,6個月 · 主要由PA飽和溶液、甲醛、甲酸等。
包涵體裂解緩沖液 · 蛋白質(zhì)分離,溶解包涵體 · 表達純化 · 500ml · 4℃,6個月 · 主要由PBS(pH7.1)、氯化鈉、EDTA組成。
pH標準緩沖粉劑(pH=4.00) · 校正pH計或酸度計 · 標準物質(zhì) · 1L · 室溫,24個月 · 該pH值是指在25℃條件下的值,誤差范圍在0.01,注意密閉保存,盡量溶解于。