枝孢霉通用PCR檢測試劑盒說明書

運輸及保存：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

以下是枝孢霉通用PCR檢測試劑盒說明書的相關產(chǎn)品：

四環(huán)素 英文名稱：Tetracycline hydrochloride 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

克林霉素酯 英文名稱：Clindamycin phosphate 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

多西環(huán)素 英文名稱：Doxycycline 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

頭孢他啶 英文名稱：Ceftazidime 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

頭孢噻肟 英文名稱：Cefotaxime 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

苯唑西林 英文名稱：Oxacillin 規(guī)格：：500mg 保存：：-20℃，避光

頭孢克洛 英文名稱：Cefaclor 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

頭孢曲松 英文名稱：Of Qu Song 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

右旋沙星 英文名稱：Dextral Antofloxacin 規(guī)格：：50mg 保存：：-20℃，避光

司帕沙星 英文名稱：Sparfloxacin 規(guī)格：：200mg 保存：：-20℃，避光

那氟沙星 英文名稱：Nadifloxacin 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

帕珠沙星 英文名稱：Pazufloxacin 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

培氟沙星 英文名稱：Pefloxacin 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

氟羅沙星 英文名稱：Fleroxacin 規(guī)格：：100mg 保存：：-20℃，避光

枝孢霉通用PCR檢測試劑盒說明書大鼠糖類抗原199(CA199)ELISA Kit  Rat Carbonhydrate Antigen,CA199 ELISA Kit

小鼠抗人生長激素抗體(IgG)ELISA Kit  Mouse anti-human growth hormone antibody IgG ELISA Kit

大鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體受體4(TRAIL-R4)ELISA Kit  Rat TRAIL-R4 ELISA Kit

犬α-1/2干擾素(IFN-α1/2)ELISA Kit  Canine Interferon alpha-1/2 ELISA kit

大鼠SHC轉化蛋白1(SHC1)ELISA Kit  Rat SHC-transforming protein 1,SHC1 ELISA kit

兔子硬骨素(SOST)ELISA Kit  Rabbit Sclerostin,SOST ELISA Kit

小鼠卷曲螺旋域結合蛋白80(CCDC80)ELISA Kit  Mouse Coiled-coil domain-containing protein 80,CCDC80 ELISA kit

大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)ELISA Kit  Rat γ glutamylcysteine synthetase,γ-GCS ELISA kit

豬細胞色素c還原酶(CCR)ELISA Kit  Pig cytochrome c reductase,CCR ELISA kit

人異質性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA Kit  Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein A1,hnRNP A1 ELISA Kit

人β淀粉樣前體蛋白(β-APP)ELISA Kit  Human β-Amyloid precursor protein,β-APP ELISA kit

兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISA Kit  Rabbit anti-brain tissue antibody,ABAb ELISA Kit

小鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)ELISA Kit  Mouse prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit

人羥基賴正己氨酸(HLNL)ELISA Kit  Human hydroxylysinonorleucine,HLNL ELISA Kit

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標準曲線。