Cell Freezing Medium
細(xì)胞凍存液(含血清)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
細(xì)胞凍存液以進(jìn)口FBS、DMSO為主要原材料配制,適用于是各種哺乳動(dòng)物原代細(xì)胞、傳代細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞等的凍存保種。
本產(chǎn)品為即用型試劑,儲(chǔ)存穩(wěn)定,使用方便,細(xì)胞存活率高。
使用方法:
細(xì)胞凍存步驟
1、 常規(guī)方法收集對(duì)數(shù)期的貼壁細(xì)胞或者懸浮細(xì)胞于試管中。
2、 根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的密度和凍存管的大小確定所需凍存的細(xì)胞數(shù)。
3、 將所需數(shù)目的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,1000rpm離心5分鐘,收集培養(yǎng)細(xì)胞沉淀,*棄去離心管中的上清液。
4、 加入適量的本凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度約為1*106-1*107/ml。輕柔地混勻細(xì)胞,制成細(xì)胞混合液。
5、 將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)記的凍存管中。
6、 密封標(biāo)記后按常規(guī)操作流程依次經(jīng)4℃,-20℃,-80℃直至液氮罐或用程序降溫儀逐級(jí)降溫凍存。
凍存細(xì)胞復(fù)蘇步驟
1、 從冰箱中取出凍存的細(xì)胞,立即置于37℃水浴槽中快速解凍。
2、 待凍存管中的細(xì)胞混合液*融化后,立即加入1ml細(xì)胞培養(yǎng)基于凍存管中與細(xì)胞混合,將其中的混合液移至含有約5ml該細(xì)胞培養(yǎng)基的離心管中,1000rpm離心5分鐘,收集凍存細(xì)胞沉淀,移去上清液(注意勿將細(xì)胞沉淀倒掉)。
3、 加入適量的新鮮培養(yǎng)基,使用移液管緩緩加入細(xì)胞沉淀中,輕柔混勻,將混勻好的細(xì)胞移至事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)容器中。
4、 鏡檢觀察,待細(xì)胞狀態(tài)恢復(fù)后可進(jìn)行其他研究或者培養(yǎng)處理。
注意事項(xiàng):
1、 取用凍存液均要在超凈工作臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作 。
2、 初次使用融化后可在2-8℃保存至少1個(gè)月,少量蛋白析出不影響凍存效果。
3、 凍存時(shí)從室溫可快速降到0℃,再降溫時(shí)一般按每分鐘降溫1~2℃,待降至-80℃以下時(shí)可放入液氮中,在液氮中細(xì)胞可保存數(shù)年或更長(zhǎng)時(shí)間.
4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:
-20℃保存,2年有效。