預期用途
此色譜層析條可用于人血清中NS1的定性檢測。它可以在IgG和IgM抗體出現(xiàn)之前對人血清中的登革熱病毒進行早期診斷,僅用于研究
實驗原理
登革熱NS1快速檢測是基于人血清中NS1抗原檢測的免疫試驗。試驗區(qū)纖維膜上包被有NS1特異性抗體,還設置了獨立的質控區(qū),以確保試驗的有效性。試驗中,將樣本直接加至樣本加樣區(qū),然后將其放置在含有3滴緩沖液的貯存孔內,樣本與緩沖液混合,然后與膠體金結合的NS1特異性單抗反應,液體在纖維膜上移動)(毛細血管的作用),與纖維膜上包被的抗NS1抗體反應,如果樣本中存在抗原,試驗區(qū)就會出現(xiàn)紅色條帶,如果試驗操作正確,質控區(qū)也會出現(xiàn)紅色條帶,則表示試驗有效
整個試驗過程大約30min
試劑盒組成
1. 快速檢測條:25人份
2. Chase緩沖液,1瓶,6ml,室溫貯存
3. 64個貯存微孔
實驗所需材料但試劑盒未提供
1. 移液器和槍頭,5-50ul
樣本采集與準備
1. 此試驗只能使用人血清,由于試劑未得到優(yōu)化,所以不能直接用于全血或血漿的檢測
2. 從紅細胞凝塊中提取出血清,不能使用溶血
3. 樣品采集后應盡快進行實驗,不要將血清長時間放置在室溫下
4. 采取靜脈穿刺采血,樣品在2-8℃下可保存7天,-20℃或更低溫度可保存30天,想要保存更長時間,應貯存在-70℃,避免反復凍融
5. 使用前應將凍存的樣品在室溫下溶解
6. 如果血清是需運輸?shù)?,則需根據(jù)聯(lián)邦感染試劑運輸法規(guī)進行包裝運輸
實驗步驟
實驗開始前,將快速檢測條和試驗樣本平衡至室溫,確保無物理損壞(如纖維膜刮傷,襯墊撕裂等),試驗中可以采用類似于酶免96孔板的貯存微孔,不能重復使用樣本貯存孔
1. 加3滴(大約120ul)Chase緩沖液至微孔中
2. 樣本底板上(sample pad )加50ul的試驗樣本,樣本底板位置在箭頭的之間,見下圖。不要將樣本加至緩沖液底板(buffer pad )
3. 立即將快速檢測條放入貯存微孔內,確保樣本側向下朝微孔方向,如果20秒內未出現(xiàn)紅色條帶,輕輕拍打樣本底板以上的箭頭部位,使樣本和酶聯(lián)物移動
4. 30min后立即讀取結果,超過了45min則會導致錯誤的結果
結果說明
陽性結果:當質控區(qū)和樣本區(qū)都出現(xiàn)了紅色條帶時則判斷為陽性,條帶模糊也判定為陽性
陰性結果:只有質控區(qū)出現(xiàn)了紅色條帶,試驗區(qū)并沒有時則認定實驗結果為陰性
試驗無效:質控區(qū)無紅色條帶出現(xiàn)則試驗無效,如果質控線沒有但試驗區(qū)出現(xiàn)紅色條帶則試驗也為無效,檢驗重新采樣檢測