以兩倍光學極限分辨率進行活細胞成像。
N-SIM S超分辨率顯微鏡采用的高速結構化照明系統(tǒng),可實現(xiàn)高達15 fps的采集速度。這使其能以傳統(tǒng)光學顯微鏡兩倍的空間分辨率(XY高達115nm)捕捉快速的生物事件。結合N-SIM S和共聚焦顯微鏡,您可以靈活地選擇共聚焦圖像中的位點,并切換到超分辨率模式以展現(xiàn)樣品細節(jié)。
主要特性
15 fps的高速超分辨率成像
尼康的新型高速結構化照明系統(tǒng)采用了一種新穎的圖案調制技術,可以快速、精確地切換照明模式。N-SIM S實現(xiàn)了令人難以置信的采集速度(高達15 fps *),可實現(xiàn)活細胞和細胞內動態(tài)的超分辨率時間序列成像。
* 2D-SIM模式,512 x 512像素,2毫秒曝光時間
活細胞成像的分辨力是傳統(tǒng)光學顯微鏡的兩倍
N-SIM S采用尼康創(chuàng)新的結構化照明顯微術方法。這項強大的技術與尼康的可以達到的1.49數(shù)值孔徑的物鏡結合,N-SIM S幾乎使傳統(tǒng)光學顯微鏡的空間分辨力提高了一倍(達到約115 nm *),幫助用戶觀察到微小的胞內結構及其相互作用。
* 該值是在3D-SIM模式下用488nm激光激發(fā)的100nm小球的FWHM測量值。在TIRF-SIM模式中,使用用488nm激光激發(fā)的40nm小球實現(xiàn)86nm。
在照明模式之間自動切換
新開發(fā)的高速結構化照明技術不僅能夠實現(xiàn)快速采集速率,還能實現(xiàn)照明模式之間的自動切換,以及針對不同波長和放大率的結構化照明模式的自動優(yōu)化。這種擴展的自動化功能可實現(xiàn)快速雙色TIRF-SIM成像以及不同SIM模式的多路復用。無論是單模還是多模態(tài)成像實驗,N-SIM S都能提供易于使用的簡化工作流程。
拍攝更大的視野
N-SIM S可以幫助用戶拍攝到66微米見方的大視野的超分辨率圖像。這個較大的成像區(qū)域使得從較大視野(例如神經(jīng)元)受益的應用/樣本的吞吐量非常高,從而減少了獲取數(shù)據(jù)所需的時間和精力。
各種觀察模式
TIRF-SIM / 2D-SIM模式
此模式可以高速捕捉超分辨率的2D圖像,并具有令人難以置信的對比度。TIRF-SIM模式可實現(xiàn)全內反射熒光觀察,其分辨力是傳統(tǒng)TIRF顯微鏡的兩倍,有助于更好地了解細胞表面的分子相互作用。
3D-SIM模式
3D-SIM模式生成三維結構化照明圖案,使橫向和軸向分辨力提高兩倍。兩種重建方法(“slice”和“stack”)可根據(jù)應用的要求(例如樣品厚度,速度等)優(yōu)化結果。Slice重建適用于在特定深度成像活細胞,因為它支持軸向超分辨率成像,具有300nm分辨率的光學切片?;贕ustafsson理論的stack重建適用于采集3D數(shù)據(jù),因為它能以比slice重建更高的對比度成像更厚的樣本。
同時雙通道成像
通過使用可選的兩個相機成像適配器*和兩個sCMOS相機,用戶可以同時進行雙色成像。
* 安道爾科技有限公司
在多尺度實驗的成像模式之間無縫切換
N-SIM S可以與共聚焦顯微鏡(如AX/AX R)同時組合??梢栽诘头糯舐?大視野共聚焦圖像中樣本中的期望位置,并且通過簡單地切換成像方法以超分辨率拍攝。將共聚焦顯微鏡與超分辨率系統(tǒng)相結合可以提供獲得超分辨率信息的更大上下文視圖的方法。
超分辨率顯微鏡的物鏡
硅油物鏡
硅油物鏡使用高粘度硅油作為浸沒液體。其折射率接近活細胞的折射率。由于這種改進的折射率兼容性,當在樣品中更深地進行超分辨率成像時,這些物鏡可以提供改進的光子收集能力和分辨率。它們在寬波長范圍內表現(xiàn)出優(yōu)異的色差校正和高透射率。
浸液物鏡
超分辨系列物鏡使用波前像差測量技術進行對準和檢查,以確保超分辨率成像所需的可能的非對稱像差和的光學性能。HP型號物鏡提供超高功率激光激發(fā)耐久性和改進的軸向色差校正,無需在N-SIM S和N-STORM系統(tǒng)之間切換物鏡。支持Ti2-E顯微鏡自動校正環(huán)的AC型物鏡可以精確,輕松地調整校正環(huán)。
干鏡
N-SIM S兼容干鏡,無需切換鏡頭即可實現(xiàn)超分辨率成像和共聚焦成像。低放大倍率、大視野干鏡即使在樣品組織的周邊也能實現(xiàn)高分辨力觀察。
* 干鏡支持2D-SIM和3D-SIM(slice重建)
橫向分辨率(熒光小球的XY軸 FWHM) | 3D-SIM模式下為115 nm*1,TIRF-SIM模式下為86 nm*2 |
軸向分辨率(熒光小球的Z軸FWHM) | 在3D-SIM模式下為269 nm*1 |
圖像采集時間 | 15 fps(TIRF-SIM / 2D-SIM,2毫秒曝光時間) |
重構圖像大小 | 1024 x 1024像素,2048 x 2048像素 |
成像模式 | TIRF-SIM 2D-SIM 3D-SIM(重構方法:單張,序列) |
多色成像 | 最多6種顏色 |
同步 | 兩種顏色 |
兼容的激光 | LU-NV系列激光單元 Standard: 405 nm, 488 nm, 561 nm, 640 nm Option: 445 nm LUD-HV系列激光單元 Standard: 405 nm, 488 nm, 561 nm, 640 nm Option: 445 nm, 515 nm Ziva Light Engine系列激光單元(2D/3D-SIM) 405 nm, 446 nm, 476 nm, 518 nm, 545 nm, 637 nm |
兼容的顯微鏡 | 電動倒置顯微鏡 ECLIPSE Ti2-E 聚焦系統(tǒng) 帶編碼器的電動XY平臺 Piezo Z載物臺 |
物鏡 | CFI SR HP Plan Apochromat Lambda S 100XC Sil (NA1.35) CFI SR HP Apochromat TIRF 100XC Oil(NA 1.49) CFI SR HP Apochromat TIRF 100XAC Oil(NA 1.49) CFI SR Plan Apochromat IR 60XC WI (NA 1.27) CFI SR Plan Apochromat IR 60XAC WI (NA 1.27) CFI Plan Apochromat Lambda 60XC(NA 0.95)* 3 CFI Plan Apochromat Lambda 40XC(NA 0.95)* 3 |
相機 | ORCA-Fusion BT sCMOS 相機 (Hamamatsu Photonics K.K.) |
軟件 | NIS-Elements AR NIS-Elements C(用于共聚焦顯微鏡 AX/AX R) 兩者都需要額外的軟件模塊NIS-A 6D和N-SIM分析 |
運行條件 | 20℃ 至 28 ℃ (± 1.5℃) |
*1這些值是使用由488nm激光激發(fā)的100nm直徑熒光小球測量的。實際分辨率取決于激光波長和光學配置。
*2使用由488nm激光激發(fā)的40nm直徑熒光小球測量該值。實際分辨率取決于激光波長和光學配置。
*3支持2D-SIM和3D-SIM(單張重構模式)。