Ambion DNase I(無 RNase)(E.C.3.1.21.1) 是一種非特異性核酸內(nèi)切酶,能夠降解雙鏈和單鏈 DNA 及染色質(zhì)。它通過水解磷酸二酯鍵產(chǎn)生具有 5'-磷酸基和 3'-羥基的單核苷酸和寡核苷酸發(fā)揮作用。無 RNase 的 DNase I 是現(xiàn)有酶中純度較高的種類,建議在不含 RNase 的情況下降解 DNA,無 RNase 對于保持 RNA 的完整性至關(guān)重要。例如,DNase I 常用于體外轉(zhuǎn)錄后去除模板 DNA,以及去除總 RNA 制備物中的 DNA 污染(特別是源自那些可能含有質(zhì)粒 DNA 的轉(zhuǎn)染細胞的 DNA 污染),可用于核糖核酸酶保護試驗、cDNA 文庫收縮以及 RT-PCR。為了達到活性,DNase I 需要二價陽離子(Mg2+ 和 Ca2+,分別約為 5 mM 和 0.5 mM),且 pH 值為 7.8。
DNase I(不含 RNase)優(yōu)于競爭對手
援引自 BioTechniques 的一篇研究報告 (Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002) 比較了來自 Sigma、Roche、Applied Science、Qiagen 和 Ambion 的 DNase I 劑中的 RNase 污染。結(jié)果表明:“除了 Ambion™ 的無 RNase DNase I 外,體外轉(zhuǎn)錄反應的 cRNA 完整性均受損,且仍受到了 DNA 污染。Ambion™ 的 DNase 用于其余需要 DNase 酶切的實驗…”。已對 Ambion™ DNase I 進行了 RNase 污染和蛋白酶活性的測試。對人基因組 DNA 進行酶切,然后對未酶切的 DNA 進行定量實時 PCR 檢測,以確定功能性。
單位定義
一單位是指在 10 min 內(nèi)于 37°C 下降解 1 µg DNA 所需的酶量,相當于 0.04 Kunitz 單位。
輔助產(chǎn)品
如需要牛 DNase I 的替代品,請考慮重組 DNase I(貨號 AM2235)。對于活性更高、耐鹽的 DNase,請參閱 TURBO™ DNase 產(chǎn)品(貨號 AM2239 和 AM2238)。
DNase I(不含 RNase)優(yōu)于競爭對手
援引自 BioTechniques 的一篇研究報告 (Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002) 比較了來自 Sigma、Roche、Applied Science、Qiagen 和 Ambion 的 DNase I 劑中的 RNase 污染。結(jié)果表明:“除了 Ambion™ 的無 RNase DNase I 外,體外轉(zhuǎn)錄反應的 cRNA 完整性均受損,且仍受到了 DNA 污染。Ambion™ 的 DNase 用于其余需要 DNase 酶切的實驗…”。已對 Ambion™ DNase I 進行了 RNase 污染和蛋白酶活性的測試。對人基因組 DNA 進行酶切,然后對未酶切的 DNA 進行定量實時 PCR 檢測,以確定功能性。
單位定義
一單位是指在 10 min 內(nèi)于 37°C 下降解 1 µg DNA 所需的酶量,相當于 0.04 Kunitz 單位。
輔助產(chǎn)品
如需要牛 DNase I 的替代品,請考慮重組 DNase I(貨號 AM2235)。對于活性更高、耐鹽的 DNase,請參閱 TURBO™ DNase 產(chǎn)品(貨號 AM2239 和 AM2238)。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.