這些純化柱可實(shí)現(xiàn)快速、簡便和可重現(xiàn)的色譜分離,并與主要的自動(dòng)液相色譜系統(tǒng)或手動(dòng)進(jìn)樣處理兼容(有關(guān)純化柱的一般特性,請參閱表 1)。純化柱可直接連接 ?KTATM 或 FPLC 系統(tǒng),無需另外的連接器。隨附的配件包使純化柱隨時(shí)可與 Luer-LokTM 注射器接頭或 1/16' 管配合使用。這些純化柱可多次再生用于親和純化。
高容量親和素瓊脂糖的特點(diǎn):
?鏈霉親和素—純化的重組鏈霉親和素蛋白(53 kDa,近中性 pI);每個(gè)分子具有四個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的四聚體
? 瓊脂糖樹脂—支持物是交聯(lián)的 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B),是適用于蛋白親和純化方法的較常用樹脂
? 惰性且穩(wěn)定—鏈霉親和素通過不帶電荷的抗浸出性共價(jià)鍵進(jìn)行固定,因此非特異性結(jié)合較低且能夠多次使用而不降低得率
? 高容量—該種微珠具有密集上樣的固定化親和素,從而提供高于 10 mg 化 BSA/mL 樹脂的結(jié)合容量
? 兩種規(guī)格—有幾種瓶大小的樹脂漿可供選擇,按 1 mL 和 5 mL 色譜純化柱預(yù)裝好
交聯(lián)的 6% 微珠狀瓊脂糖 (CL-6B) 的特性:
?支持 pH 值穩(wěn)定性:2 至 14(短期);3 至 13(長期)
? 平均粒徑:45 至 165 微米
?排阻極限:10,000 至 4,000,000 道爾頓
? 推薦流速:4 mL/分鐘(1 mL 色譜柱)、5 mL/分鐘(5 mL 色譜柱)
? 線性速度:30 cm/小時(shí)
?壓力:0.3 MPa,43.5 psi 或 3 bar
Pierce 高容量鏈霉親和素色譜純化柱由純化的重組鏈霉親和素組成,該重組鏈霉親和素以高密度共價(jià)固定到高質(zhì)量交聯(lián)的 6% 微珠狀瓊脂糖上。可使用此親和素樹脂對樣品中的化抗體、蛋白、肽、核酸,和其他分子或相互作用復(fù)合物進(jìn)行捕獲、免疫沉淀、去除,或純化。
親和素是一種含有四個(gè)結(jié)合位點(diǎn)的四聚體蛋白,與親和素相似。阿維丁鏈霉菌中的天然蛋白不含碳水化合物,酸性 pI 為 5.5,質(zhì)量為 75 kDa。用于生產(chǎn) Pierce 親和素樹脂的重組蛋白具有近中性等電點(diǎn),質(zhì)量為 53 kDa。由于不存在碳水化合物,親和素的非特異性結(jié)合通常比親和素(來自雞蛋清)弱。
有關(guān)詳細(xì)信息,請參見:用于脫鹽和親和純化的色譜純化柱