BACE1（β-分泌酶）是一種關(guān)鍵酶，它參與了在阿爾茨海默病 (AD) 的細(xì)胞外淀粉樣蛋白斑塊中發(fā)現(xiàn)的淀粉樣蛋白 β-肽 (Abeta) 的生成。在某些情況下，早發(fā)性家族性 AD 可歸因于淀粉樣蛋白前體蛋白 (APP) 的“瑞典”突變，該突變通過 BACE1 顯著增強(qiáng)該蛋白的切割。這和其他遺傳以及病理學(xué)證據(jù)形成了專注于抑制 BACE1 和其他 APP 切割酶（如 γ-分泌酶）的治療方法。BACE1 熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 檢測試劑盒為篩選潛在 BACE1 抑制劑提供了一種靈敏和高效的方法。該試劑盒使用純化的桿狀病毒表達(dá)的 BACE1 和基于“瑞典”突變體的新紅色 FRET 肽底物。
BACE1 FRET 檢測試劑盒具有以下特點(diǎn)：
?發(fā)射紅光以減少化合物干擾
? 激發(fā)波長為 545 nm，讀取發(fā)射波長為 585 nm
? 在溶液中執(zhí)行的易于使用、快速、均勻的檢測
? 適用于高通量篩選的通用規(guī)格
? 結(jié)果穩(wěn)定 — 可進(jìn)行長達(dá) 24 小時(shí)的測量
BACE1 FRET 檢測的原理如下：用兩種熒光基團(tuán)（一種熒光供體（羅丹明 (Rh) 衍生物）和一種專有的淬滅受體）合成肽底物。選擇這兩個(gè)基團(tuán)之間的距離，使得在光激發(fā)時(shí)供體 (D) 熒光能量由受體 (A) 通過量子力學(xué)現(xiàn)象（被稱為共振能量轉(zhuǎn)移）顯著淬滅（圖 1）。經(jīng)蛋白酶切割后，熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離，可恢復(fù)供體的全熒光得率。因此，弱熒光肽底物在酶促切割時(shí)變?yōu)楦邿晒馕镔|(zhì)；熒光增加與蛋白水解速率呈線性相關(guān)。
BACE1 酶的來源：
在重組桿狀病毒感染的昆蟲細(xì)胞中表達(dá)了編碼人 BACE1 的第 1-460 位氨基酸的 cDNA 序列，與胞外域相對應(yīng)。純化的 BACE1 以 proBACE1 形式存在，表觀分子量為 55 kDa，N 端序列為 TQHGIRLPLR。
BACE1 FRET 檢測試劑盒具有以下特點(diǎn)：
?發(fā)射紅光以減少化合物干擾
? 激發(fā)波長為 545 nm，讀取發(fā)射波長為 585 nm
? 在溶液中執(zhí)行的易于使用、快速、均勻的檢測
? 適用于高通量篩選的通用規(guī)格
? 結(jié)果穩(wěn)定 — 可進(jìn)行長達(dá) 24 小時(shí)的測量
BACE1 FRET 檢測的原理如下：用兩種熒光基團(tuán)（一種熒光供體（羅丹明 (Rh) 衍生物）和一種專有的淬滅受體）合成肽底物。選擇這兩個(gè)基團(tuán)之間的距離，使得在光激發(fā)時(shí)供體 (D) 熒光能量由受體 (A) 通過量子力學(xué)現(xiàn)象（被稱為共振能量轉(zhuǎn)移）顯著淬滅（圖 1）。經(jīng)蛋白酶切割后，熒光基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離，可恢復(fù)供體的全熒光得率。因此，弱熒光肽底物在酶促切割時(shí)變?yōu)楦邿晒馕镔|(zhì)；熒光增加與蛋白水解速率呈線性相關(guān)。
BACE1 酶的來源：
在重組桿狀病毒感染的昆蟲細(xì)胞中表達(dá)了編碼人 BACE1 的第 1-460 位氨基酸的 cDNA 序列，與胞外域相對應(yīng)。純化的 BACE1 以 proBACE1 形式存在，表觀分子量為 55 kDa，N 端序列為 TQHGIRLPLR。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
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