BSA 蛋白檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品的特點(diǎn):
•便利—1 mL 安瓿
• 通用—被視為比色蛋白檢測(cè)中蛋白定量的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)
• 純凈且穩(wěn)定—在含 0.05% 的超純 0.9% 鹽水溶液中提供;室溫穩(wěn)定
• 準(zhǔn)確且一致—與 NIST 參考相比,以 2.00 +/- 0.03 mg/mL 的濃度精確配制
這些牛血清白蛋白 (BSA) 溶液是蛋白濃度參考標(biāo)準(zhǔn)品,適用于 BCA、Bradford 和其他蛋白檢測(cè)方案。BSA 是普遍認(rèn)可的總蛋白定量參考蛋白。白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品在超純 0.9% 氯化鈉(鹽水)溶液中以 2 mg/mL 的濃度精確配制。儲(chǔ)存液的濃度可通過與美國國家標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)研究所 (NIST) 的純化 BSA(組分 V)的直接比較來校準(zhǔn)。
應(yīng)用:
• 蛋白檢測(cè)定量標(biāo)準(zhǔn)品(BCA 蛋白檢測(cè)、考馬斯-Bradford 檢測(cè)等)
• 用于脫鹽和其他色譜柱程序的蛋白回收對(duì)照品
• 分光光度計(jì)紫外燈的一般校準(zhǔn)(280 nm 處的吸光度)
蛋白標(biāo)準(zhǔn)品的選擇可能是任何蛋白檢測(cè)中的錯(cuò)誤來源。標(biāo)準(zhǔn)品的較佳選擇是待測(cè)樣品中所包含的豐度的經(jīng)純化且已知濃度的蛋白。通常,無法獲得高度純化的已知濃度的目標(biāo)蛋白質(zhì),或者過于昂貴而無法用作標(biāo)準(zhǔn)品,或者樣品本身就是許多蛋白的混合物(例如細(xì)胞裂解物)。在這種情況下,標(biāo)準(zhǔn)品是用選定的蛋白檢測(cè)方法可得到正常(即平均)顏色響應(yīng)曲線的一種標(biāo)準(zhǔn)品,并且所有研究人員都可以隨時(shí)獲得。BSA 即為這種蛋白,并且 Pierce 白蛋白標(biāo)準(zhǔn)品是即用型 BSA 標(biāo)準(zhǔn)品的便利來源。
為了在估計(jì)未知樣品中的總蛋白濃度時(shí)獲得高準(zhǔn)確度,必須在每次進(jìn)行測(cè)定時(shí)包括標(biāo)準(zhǔn)曲線。對(duì)于產(chǎn)生非線性標(biāo)準(zhǔn)曲線的蛋白檢測(cè)方法尤其如此。在確定用于定義標(biāo)準(zhǔn)曲線的標(biāo)準(zhǔn)品和重復(fù)樣品的數(shù)量時(shí),取決于標(biāo)準(zhǔn)曲線中的非線性程度和所需的準(zhǔn)確度。一般來說,如果顏色響應(yīng)為線性,則只需很少的點(diǎn)即可構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通常,使用曲線上每個(gè)點(diǎn)的至少兩份重復(fù)樣品來構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。
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