實(shí)驗(yàn)室核酸檢測全流程

時(shí)間：2021/7/20閱讀：24996

冬季以來，1情再次變成“常態(tài)”，各地出現(xiàn)不同程度和規(guī)模的1情以來，每天都有成千上萬份等待進(jìn)行檢測的核酸樣本。這些樣本在實(shí)驗(yàn)室是如何被檢測出來的？

根據(jù)危險(xiǎn)度等級，包括傳染病原的傳染性和危害性，上將生物實(shí)驗(yàn)室將實(shí)驗(yàn)室分為P1、P2、P3和P4四個(gè)等級。P1-4實(shí)驗(yàn)室可承擔(dān)的工作也根據(jù)這一安全等級進(jìn)行劃分，其嚴(yán)格等級從低到高。P3實(shí)驗(yàn)室又稱防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，適用于處理對人體、動植物或環(huán)境具有高度危害性，通過直接接觸或氣溶膠使人傳染上嚴(yán)重甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子，通常有預(yù)防和治療措施。

核酸檢測在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)是如何進(jìn)行的？

大致可分為：檢測前的準(zhǔn)備工作——核對樣本信息——樣本滅活——開蓋加樣和核酸提取——PCR反應(yīng)體系配制——核酸擴(kuò)增檢測——檢測完成——高壓滅菌。

檢測前

打開樣本前，檢測人員需穿戴好個(gè)人裝備防護(hù)裝備，如護(hù)目鏡、面屏、雙層醫(yī)用乳膠手套、防水靴套，每個(gè)步驟不能出錯(cuò)。

檢測中

1、在實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)域內(nèi)使用75%酒精對送樣箱進(jìn)行外表面消毒，消毒完畢后核對被檢測樣本的姓名、年齡、性別等信息進(jìn)行核對。

2、將樣本放在水浴箱中進(jìn)行半個(gè)小時(shí)的56℃的高溫滅活，使病毒蛋白失去生理活性，在不影響病毒蛋白的基因序列的前提下，使病毒失去感染、致病和繁殖能力，保證檢測的安全性。

3、實(shí)驗(yàn)員拿到滅活后的樣本時(shí)，先是進(jìn)行振蕩，盡量讓拭子上的病毒洗脫在培養(yǎng)基溶液中，第二步是進(jìn)行5分鐘的沉淀。第三部進(jìn)行開蓋加樣，這一步必須實(shí)行人工操作，并且需要兩人高度配合完成。一人擰開樣本罐的蓋子，另一人拿微量移液器在樣本罐中吸取微量溶液，放到另一個(gè)提取管里，再擰上管蓋。

核酸提取可以使用儀器輔助，但由于比對需要，往往要加以人工操作，需要反復(fù)進(jìn)行離心、加試劑、洗滌等10多個(gè)步驟。其中，需要打開管蓋的操作就達(dá)7次以上，完成一例人工核酸提取需要50分鐘左右。

4、走出核心試驗(yàn)區(qū)，開始進(jìn)行PCR反應(yīng)體系配制，將提取的病毒核酸加入到核酸擴(kuò)增檢測試劑中。

5、將配制好的PCR反應(yīng)物放置在熒光定量PCR儀上。在電腦上設(shè)置PCR反應(yīng)條件，運(yùn)行儀器，開始核酸擴(kuò)增檢測。

檢測后

檢測人員需要實(shí)時(shí)關(guān)注檢測情況，約1.5小時(shí)后，核酸擴(kuò)增完成，進(jìn)行檢測結(jié)果判讀。至此，整個(gè)流程完成，大概4小時(shí)。

也是非常重要的一步就是對污染物的高壓滅菌處理。實(shí)驗(yàn)過程產(chǎn)生的污染物通過高壓滅菌后，按普通醫(yī)療垃圾處理。

可以說，核酸檢測的過程也是與時(shí)間賽跑的過程。尤其是需要大規(guī)模進(jìn)行核酸檢測的場景中，運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測顯然要付出較高的時(shí)間成本?？梢苿訉?shí)驗(yàn)室的運(yùn)用為提高核酸檢測效率提供了行之有效的方法。

實(shí)驗(yàn)室核酸檢測全流程

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