詳細(xì)介紹
無(wú)菌室一般是在生物實(shí)驗(yàn)室內(nèi)專辟的一個(gè)小房間,面積不宜過(guò)大,約4m2~5m2,高2.5m左右即可。無(wú)菌室外要設(shè)一個(gè)緩沖間、凈化風(fēng)淋間及更衣間。無(wú)菌室和緩沖間都必須密閉。室內(nèi)裝備必須有空氣過(guò)濾裝置。無(wú)菌室和緩沖間都裝有紫外線燈,無(wú)菌室的紫外線燈距離工作臺(tái)面 lm。無(wú)菌室內(nèi)的地面、墻壁必須平整,不易藏污垢,便于清潔。工作臺(tái)的臺(tái)面必須處于水平狀態(tài)。工作人員進(jìn)入無(wú)菌室應(yīng)在更衣室穿戴好滅菌的衣、帽、鞋,經(jīng)過(guò)凈化風(fēng)淋室,再到緩沖間,然后進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行檢驗(yàn)工作。 縣級(jí)市的企業(yè)一般實(shí)驗(yàn)室多使用小型超凈工作臺(tái)。超凈工作臺(tái)其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,便于移動(dòng),工作臺(tái)內(nèi)有紫 外燈和凈化風(fēng)機(jī),外部是推拉式小門或開(kāi)兩個(gè)洞的玻璃門,操作時(shí)將雙臂伸進(jìn)去即可。
(1)無(wú)菌操作間的潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí),室內(nèi)溫度保持在20℃-24℃,濕度保在45%~60%,超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù),在無(wú)菌室或超凈工作臺(tái)開(kāi)啟的狀態(tài)下,取內(nèi)徑90mm的無(wú)菌培養(yǎng)皿若干,無(wú)菌操作分別注入融化并冷卻至約45℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基的 15mL,放至凝固后,倒置于36℃ ±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 48h,證明無(wú)菌后,取平板 3~5個(gè),分別放置在工作位置的左中右等處,開(kāi)蓋暴露30分鐘后,倒置于36℃ ±1℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 48h,取出檢查。100級(jí)潔凈區(qū)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落,10000級(jí)的潔凈室平均不得超過(guò)3個(gè)菌落,如超過(guò)限度,應(yīng)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行消毒,直至重復(fù)檢查合乎要求為止。
(2)無(wú)菌室應(yīng)保持清潔整齊,室內(nèi)僅存放必須的檢驗(yàn)用具如酒精燈、酒精棉、打火機(jī)、鑷子、接種環(huán)、剪刀及玻璃筆等。嚴(yán)禁堆放雜物,以防污染。
(3)無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液 ,如 5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅溶液等等。
(4)需要帶入無(wú)菌室使用的儀器、藥品、玻璃器皿等一切物品,均應(yīng)包扎嚴(yán)密或應(yīng)經(jīng)適宜的方法滅菌。如培養(yǎng)皿、吸管用不銹鋼簡(jiǎn)裝好在160℃-170℃的干燥箱中滅菌 1h~2h;生理鹽水用高壓滅菌器于121℃滅菌20分鐘等。
(5)無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室和緩沖間的紫外燈輻照30分鐘以上,并且同時(shí)打開(kāi)凈化風(fēng)機(jī)進(jìn)行換氣。 在紫外燈關(guān)閉后半小時(shí)方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行工作。在樣品檢驗(yàn)完畢后,應(yīng)及時(shí)清理剩余樣品和各種藥品及玻璃器皿,安全退出后再打開(kāi)所有紫外燈輻照滅菌30分鐘。
(6)送檢樣品在檢驗(yàn)前應(yīng)保持外包裝完整 ,不得開(kāi)啟,以防污染。檢驗(yàn)前,用75%的酒精棉球消毒外表面,必要時(shí)用點(diǎn)燃的酒精棉進(jìn)行滅菌。
(7)每次操作過(guò)程中,均應(yīng)做空白對(duì)照 ,以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
(8)吸取菌液時(shí) ,必須用吸耳球吸取,切勿直接用口接觸吸管,如吸管碰到手及其它未滅菌的物體,必須重新更換,以防污染。
(9)接種針每次使用前后 ,必須通過(guò)火焰燃燒滅菌,待冷卻后,方可接種培養(yǎng)物。
(10)帶有菌液的吸管、試管等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%的來(lái)蘇兒溶液的消毒桶內(nèi)消毒,24h取出沖洗;培養(yǎng)皿則需在高壓滅菌器中重新滅菌后方可處理營(yíng)養(yǎng)基,切記不要直接沖入下水道中,防止阻塞。如有菌液灑在桌上或地上,應(yīng)立即用5%石碳酸溶液或 3%的來(lái)蘇兒傾覆在被污染處至少 30min,再做處理,工作衣帽等受到菌液污染時(shí),應(yīng)立即脫去,高壓蒸汽滅菌后洗滌。
無(wú)塵間潔凈無(wú)菌室裝修 生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室改造設(shè)計(jì)
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