深圳容金科技有限公司

主營產(chǎn)品: 食品安全檢測試劑盒$r$n獸藥安全檢測試劑盒$r$n農(nóng)藥殘留檢測試劑盒$r$n真菌毒素檢測試劑盒$r$n貝類毒素試劑盒$r$n雌激素檢測試劑盒$r$n工業(yè)污染物檢測試劑盒

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曾聲有
址:
深圳市寶安區(qū)福永街道懷德咸田三區(qū)富德商務(wù)大廈1030號(hào)
編:
518103
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http://m.hg2288855.com/st17167/
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*總量檢測試劑盒
*總量檢測試劑盒
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更新時(shí)間:2017-07-07 22:15:54瀏覽次數(shù):4737

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【簡單介紹】
*總量檢測試劑盒
【詳細(xì)說明】

 

概述
*(Aflatoxin, AF)是由多種霉菌代謝的毒性產(chǎn)物,例如Asperillus flavus Asperillus parasiticus霉菌。他們具有致癌性,存在于谷物、堅(jiān)果、棉籽和其它食品或動(dòng)物飼料中。谷物可能被*的衍生物:B1、B2、G1G2其中一種或幾種污染。AFB1是目前檢測到的zui毒的*,其他類型的*如果污染的濃度很高也存在很大的危險(xiǎn)。*能夠引發(fā)人類很多病癥包括肝癌、黃曲霉中毒、萊耶綜合癥和慢性肝炎。動(dòng)物容易攝取到*的原因是動(dòng)物吃的飼料在生長、收割和貯存過程中可能被能夠產(chǎn)生*的真菌污染。世界上大多數(shù)國家的政府已經(jīng)對人類和動(dòng)物性食品中制定了嚴(yán)格的**。
適用
HELICA*分析測定試劑盒原理是競爭酶聯(lián)免疫法,適用于檢測谷物、堅(jiān)果、棉花種子、加工過的谷類食物、和一些其它的動(dòng)物食品中的*B1、B2、G1 和G2。
原理
HELICA*總量測定法是一種固相競爭酶聯(lián)免疫分析測定方法。聚苯乙烯微孔板中包被抗*的高親和力抗體,這種抗體和*的四種亞型都能發(fā)生交叉反應(yīng))。利用70%甲醇提取樣品中的*,把提取的樣品和HRP(辣根過氧化物酶)標(biāo)記的*B1混勻并加入對應(yīng)的孔檢測。酶標(biāo)記毒素與標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品中*競爭與包被在微孔底部的抗體結(jié)合。孵育一段時(shí)間后,倒出孔里的液體,清洗后加入顯色底物,在酶的作用下孔里將會(huì)出現(xiàn)藍(lán)色。顯色顏色的深淺與結(jié)合物的量成正比例的關(guān)系,與標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中AFM的量成反比例關(guān)系。所以,標(biāo)準(zhǔn)品或樣品中的AFM濃度越高,顯色的藍(lán)色將會(huì)越淺。加入酸,終止反應(yīng),底物顏色由藍(lán)色變?yōu)樽攸S色。微孔板放進(jìn)酶標(biāo)儀里,在OD450nm讀取吸光度值。樣品的吸光度值與試劑盒中標(biāo)準(zhǔn)OD值相比較,相對應(yīng)得出結(jié)果。
試劑盒組成
1×小袋
抗體包被的微孔板
96孔板(12×8微孔板用鼠源AF單克隆抗體)
1×
預(yù)混板(綠色)
96孔板(12×8)沒有包被抗體
6×小瓶
AFM標(biāo)準(zhǔn)品
1.5mL/瓶,AFM的濃度分別為0.0、0.2、0.5、
1.0、2.0、4.0ng/mL 溶解在有機(jī)溶液中。
2×小瓶
HRP-AF偶聯(lián)物
2 x 12mL HRP-AFB1 添加防腐劑
的緩沖溶液,可以直接使用
1×小瓶
底物試劑
15mL TMB,可以直接使用
1×小瓶
終止液
15mL 酸性液體,可以直接使用
樣品提取步驟
1.制備提取液:70%甲醇,用蒸餾水或無離子水稀釋每個(gè)樣品需要100ml樣品提取液)。
2.研磨樣品(使50%的樣品可以通過一個(gè)20目的濾網(wǎng))。
3.稱量20g研磨過濾后的樣品加入100ml樣品提取液,樣品稀釋比為1:5(w/v)。
4.在混合器上至少震蕩2分鐘。
5.用濾紙過濾5-10ml 以上處理的液體,收集濾液待測。
樣品測定步驟
1、使用前將試劑拿到室溫。
2、取出混合板放于微孔支架上用于標(biāo)準(zhǔn)和樣品的測試,取相同數(shù)量的微孔(包被有抗體)置于另一個(gè)微孔支架上。
3、在每個(gè)混合板微孔中加入 200μl 酶標(biāo)結(jié)合物。
4、在對應(yīng)的孔中加入100 μl 標(biāo)準(zhǔn)或樣品,用槍頭混合3次,
注意:操作者要把每個(gè)孔標(biāo)記清楚
5轉(zhuǎn)移100ul預(yù)混板微孔中的液體到對應(yīng)的包被有抗體的微孔中,室溫孵育15分,使用多道移液器。
6、將孔里的液體倒入合適的容器中,用蒸餾水或無離子水洗板,然后迅速棄掉洗液到合適的容器中,重復(fù)洗5次。在一層厚的吸水紙上拍板,去掉殘留的洗液。
7、在吸水紙上拍打,盡可能地將水拍干。
8、每孔加入100 μl底物溶劑,室溫孵育5min。
9、每孔加入 100 μl 終止液。
10、對比標(biāo)準(zhǔn)和樣品的顏色,或在OD450 nm讀數(shù)。
結(jié)果分析
使用原有的OD值或?qū)嶒?yàn)獲得的OD值與標(biāo)準(zhǔn)曲線中*濃度為0時(shí)OD值的百分比值與標(biāo)準(zhǔn)中*含量建立劑量效應(yīng)曲線。通過在標(biāo)準(zhǔn)品曲線中添加新數(shù)值計(jì)算被測物質(zhì)中*的濃度。因?yàn)闃悠吩谔幚淼倪^程中稀釋了5倍,所以實(shí)際值是測定值的5倍。樣品在標(biāo)準(zhǔn)曲線上的稀釋范圍是1-20ppb,如果樣品的濃度大于zui高標(biāo)準(zhǔn),需要用70%的樣品提取液來稀釋后再測定,計(jì)算結(jié)果時(shí)要考慮到稀釋的倍數(shù)。
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