1、 加樣：分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔、空白孔。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)孔7孔，依次加入100μL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品（見(jiàn)試劑準(zhǔn)備2）?？瞻卓准?span lang="EN-US">100μL（見(jiàn)試劑準(zhǔn)備第二步zui后一管），余孔加待測(cè)樣品100μL，酶標(biāo)板加上覆膜，37^oC溫育2小時(shí)。

2、 棄去液體，甩干，不用洗滌。

3、 每孔加檢測(cè)溶液A工作液100μL（臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37^oC溫育1小時(shí)。

4、 棄去孔內(nèi)液體，每孔用350μL的洗滌液洗滌，浸泡1-2分鐘，吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干），重復(fù)洗板3次。zui后一次洗滌后，要把孔內(nèi)的洗滌液*甩干。自動(dòng)洗板機(jī)亦可。

5、 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（臨用前配制）100μL，加上覆膜，37^oC溫育30分鐘。

6、 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟4。