牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒
ELISA試劑盒常見問題解析：

1.加樣量不*？
解決方法：樣品稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。
2.樣品數(shù)量多少不一，加樣時(shí)間有長(zhǎng)有短？
解決方法：重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近。
3.保溫時(shí)間不*，洗滌條件不*，操作人員不*？
解決方法：重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持*，以排除這些因素造成的不*的可能性。

牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒
樣品測(cè)定

1． 移取xx微升 去干擾液（Reagent C）到上述待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)樣品管里，混勻
2． 加入xx微升 反應(yīng)液（Reagent D）
3． 加入xx微升 顯色液（Reagent E），混勻
4． 室溫下孵育20分鐘
5． 放進(jìn)微型臺(tái)式離心機(jī)離心3分鐘，速度為5000g
6． 移取1毫升上清液到比色皿
7． 即刻放進(jìn)分光光度儀檢測(cè)，獲得待測(cè)樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品讀數(shù)

牛白介素4(IL-4) ELISA 試劑盒
標(biāo)本要求
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后，離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20 分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100 萬(wàn)/ml 左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PB（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20 分鐘左右（2000-3000 轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融