詳細(xì)介紹
人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書,用途,價(jià)格,品牌,注意事項(xiàng)等資訊,本司*供應(yīng)進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)ELISA檢測(cè)試劑盒,產(chǎn)品種類繁多,現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保障,ELISA種屬涵蓋了科研實(shí)驗(yàn)所需的所有動(dòng)物,為客戶提供了免費(fèi)代測(cè)服務(wù),咨詢!
中文名:人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒
別名:人糖類抗原199(CA199)ELISA Kit
貨號(hào):fk-m0038
供應(yīng)商:上海樊克
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個(gè)月
樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
檢測(cè)方法:酶聯(lián)免疫吸附法
檢測(cè)波長(zhǎng):450nm
研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、其他研究。
供應(yīng)貨期:現(xiàn)貨供應(yīng)
友情提示:僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于其他用途;使用前仔細(xì)閱讀ELISA試劑盒說(shuō)明書。
人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒組成及試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書說(shuō)明:
1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。
2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說(shuō)明書可能會(huì)有不*之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書實(shí)驗(yàn)原理:
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗CA199抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗CA199抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的CA199呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書標(biāo)本的采集及保存:
1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。
人糖類抗原199(CA199)ELISA檢測(cè)試劑盒標(biāo)本的稀釋原則:
首先通過(guò)文獻(xiàn)檢索的方式了解待測(cè)樣本的大致含量,確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi),檢測(cè)的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過(guò)程中,應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計(jì)算濃度時(shí),稀釋了“N”倍,標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則:2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋后,分別稀釋100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml(不要少于0.5ml)100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
人糖類抗原199(CA199)ELISA Kit生物素標(biāo)記抗體的稀釋原則:
臨用前以生物素標(biāo)記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素標(biāo)記抗體加990μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則:
臨用前以辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(每孔100μl),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
人糖類抗原199(CA199)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉,再各取50μl 分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為120 U/L ,80 U/L,40 U/L,20 U/L,10 U/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將30(48T 的20 倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T 的20 倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復(fù)5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。測(cè)定應(yīng)在加終止
液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人糖類抗原199(CA199)ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng):
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD 值于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD 值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測(cè)定,計(jì)3算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請(qǐng)避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD 值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD 值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R 值為0.990 以上。
2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%和11%
檢測(cè)范圍:
8 UL– 150 U/L
人糖類抗原199(CA199)ELISA Kit相關(guān)產(chǎn)品如下:
豬S100鈣結(jié)合蛋白A4(S100A4)ELISA試劑盒
魚防御素β1(DEFβ1)ELISA試劑盒
大鼠溶質(zhì)載體家族2(促進(jìn)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白)成員3(SLC2A3)ELISA試劑盒
猴肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA試劑盒
雞核糖核酸酶L(RNASEL)ELISA試劑盒
雞谷胱甘肽還原酶(GSR)ELISA試劑盒
兔腺苷酸環(huán)化酶3(ADCY3)ELISA試劑盒
牛腸堿性磷酸酶(IAP)ELISA試劑盒
犬硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒
人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒
大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒
兔基質(zhì)Gla蛋白(MGP)ELISA試劑盒
牛細(xì)胞表面粘蛋白1(MUC1)ELISA試劑盒
雞磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒
大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒
豬抗瓜氨酸纖維蛋白原抗體(CFAb)ELISA試劑盒
小鼠核糖核酸酶A3(RNASEA3)ELISA試劑盒
牛半乳凝素8(GAL8)ELISA試劑盒
人清道夫受體B(SRB)ELISA試劑盒
綿羊基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)ELISA試劑盒
豬谷胱甘肽過(guò)氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒
兔IgEFc片段,低親和力II,受體(CD23)(FCER2)ELISA試劑盒
犬巨噬細(xì)胞炎性蛋白相關(guān)蛋白1(MRP1)ELISA試劑盒
小鼠β微管蛋白(TUBB)ELISA試劑盒
馬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)ELISA試劑盒
人PDZ和LIM結(jié)構(gòu)域7(Enigma)(PDLIM7)ELISA試劑盒