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如何選擇合適您細胞分選的MACS分選柱
閱讀：6394 發(fā)布時間：2021-6-29美天旎分選柱（Column）是MACS技術(shù)的核心，其特點如下：填充有不同規(guī)格的鐵珠，可分選或者去除10^7-10^10細胞；表面親水包被，不損傷細胞，同時保證流速；可以將磁場放大1000-10000倍，因此只需少量的細胞表位被識別即可被磁場捕獲，從而為后續(xù)實驗預(yù)留足夠抗原表位，如磁珠分選后的細胞無需切除磁珠即可直接染流式抗體，而不受影響。
美天旎的分選柱分幾類，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，這些有什么區(qū)別呢，您在實驗中又該如何去選擇適合您的分選柱呢？
我們知道，美天旎的MACS分選策略有陽性分選、去除分選，那我們就按兩種分選策略來分析如何選擇恰當?shù)姆诌x柱：
美天旎的分選柱分幾類，如MS、LS、LD、autoMACS column 等，那么，這些有什么區(qū)別呢，您在實驗中又該如何去選擇適合您的分選柱呢？
我們知道，美天旎的MACS分選策略有陽性分選、去除分選，那我們就按兩種分選策略來分析如何選擇恰當?shù)姆诌x柱：
陽性分選
1、根據(jù)要分選的細胞數(shù)量選擇分選柱：
1、根據(jù)要分選的細胞數(shù)量選擇分選柱：
MS柱容納的細胞上樣量是2×10^8細胞（既包含陽性細胞又包含陰性細胞），而其能捕獲的陽性細胞是10^7。
LS分選柱細胞上樣量是2×10^9細胞（既包含陽性細胞又包含陰性細胞），而其能捕獲的陽性細胞是10^8。
2、目的細胞是常見細胞還是稀有細胞
為了在分選稀有細胞（表達率<5%）時得到較更高的純度，您可以使用兩個分選柱：用一根分選柱進行一次分選后，陽性成份再過一次新的分選柱。在陽性分選中，過兩次分選柱可以獲得更高純度的細胞。
3、大體積的細胞
另外，如果您要分選的目的細胞是體積較大的特殊細胞，如原生動物細胞、人皮膚郎罕式細胞、鼻咽癌細胞、心肌細胞等，那推薦您使用Large cell columns。因為大細胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細胞順利通過。
LS分選柱細胞上樣量是2×10^9細胞（既包含陽性細胞又包含陰性細胞），而其能捕獲的陽性細胞是10^8。
2、目的細胞是常見細胞還是稀有細胞
為了在分選稀有細胞（表達率<5%）時得到較更高的純度，您可以使用兩個分選柱：用一根分選柱進行一次分選后，陽性成份再過一次新的分選柱。在陽性分選中，過兩次分選柱可以獲得更高純度的細胞。
3、大體積的細胞
另外，如果您要分選的目的細胞是體積較大的特殊細胞，如原生動物細胞、人皮膚郎罕式細胞、鼻咽癌細胞、心肌細胞等，那推薦您使用Large cell columns。因為大細胞柱的鐵珠間隙足夠大，容許這些特殊的大體積細胞順利通過。
去除分選
去除分選中需要考慮以下幾個因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads嗎？
2 抗原表達強還是弱呢？
3 您需要更高的純度還是回收率呢？
4 您需要分選多少細胞？
根據(jù)這幾個因素，您可以選擇合適的去除分選柱。
去除分選中需要考慮以下幾個因素：
1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads嗎？
2 抗原表達強還是弱呢？
3 您需要更高的純度還是回收率呢？
4 您需要分選多少細胞？
根據(jù)這幾個因素，您可以選擇合適的去除分選柱。
注意：某些MACS Cell Isolation Kits先進性去除分選（第一步分選），然后進行陽性分選（第二步分選）。請使用說明書中推薦的分選柱。
三、分選柱對應(yīng)搭配的分選器（磁力架）的推薦
1、MS分選柱和Large Cell Columns，適配的分選器為單通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。
三、分選柱對應(yīng)搭配的分選器（磁力架）的推薦
1、MS分選柱和Large Cell Columns，適配的分選器為單通道的miniMACS或者8通道的OctoMACS。
2、LS和LD分選柱或 Whole Blood Columns，適配的分選器為單通道的midiMACS或者4通道的QuadroMACS。
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