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合肥國肽生物科技有限公司
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更新時間:2020-07-16 15:56:14瀏覽次數(shù):613次
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國肽生物是一家專業(yè)從事多肽產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和銷售以及多肽技術(shù)轉(zhuǎn)讓的*。BP公司成立之初,便成功收購了國內(nèi)幾家多肽、抗體公司,是目前國內(nèi)的專業(yè)多肽合成、抗體制備、蛋白表達的規(guī)模型生產(chǎn)企業(yè)。國肽生物專長于熒光標記肽、同位素標記肽、人工胰島素、藥物肽、化妝品肽、長肽困難肽等產(chǎn)品的合成與研發(fā),致力于學術(shù)水平的科研提升,搭建學術(shù)交流平臺,促進前沿、專業(yè)的學術(shù)知識推廣,推動多肽在生物醫(yī)學材料等領(lǐng)域的
多肽標記和修飾
目前多肽標記及修飾的內(nèi)容非常多,廣泛應用在多肽藥物,多肽生物學,多肽抗體以及多肽試劑的研究中。目前應用廣泛的有:非放射性核素標記(C13,H2,N15),熒光標記(FAM,F(xiàn)ITC等),生物素標記,磷酸化修飾等。
1. 非放射性核素標記
目前在非放射性核素標記中,使用廣泛的仍然是C13,H2,因為其使用安全,放射性小?,F(xiàn)在有比較*的非放射性標記的氨基酸,可以按照正常的多肽合成方法將標記好的氨基酸直接連接到多肽上。
2. 熒光標記
熒光標記由于沒有放射性,實驗操作簡單。因此,目前在生物學研究中熒光標記應用非常廣泛,熒光標記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系,對于有游離羧基的采用的方法與接肽反應相同,也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。 在N端標記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來形成熒光素,通常會伴有后一個氨基酸的去除,但當有一個間隔器如氨基己酸,或者是通過非酸性環(huán)境將目的肽從樹脂上切下來時,這種情況可避免。
3.生物素標記
生物素-親合素系統(tǒng) (biotin-avidin system,BAS),是70年代后期應用于免疫學,并得到迅速發(fā)展的一種新型生物反應放大系統(tǒng)。由于它具有生物素與親合素之間高度親和力及多級放大效應,并與熒光素、酶、同位素等免疫標記技術(shù)有機地結(jié)合,使各種示蹤免疫分析的特異性和靈敏度進一步提高。主要有用于標記多肽氨基的生物素N-羥基丁二酰亞胺酯(BNHS)和生物素對硝基酚酯(pBNP),其中以BNHS,當然,也可以直接使用生物素也可以標記,因為其結(jié)構(gòu)上有個游離的羧基,采用HBTU/HOBt/DIEA方法縮合,由于生物素的溶解度低,使用DMSO/DMF的混合溶劑增加溶解度。
4. 磷酸肽合成
磷酸肽在生命過程中發(fā)揮重要作用,磷酸化的位置在多肽上的Ser,Thr,Tyr。目前磷酸肽合成一般都采用磷酸化氨基酸,目前使用的都是單芐基磷酸化氨基酸。磷酸化氨基酸的連接一般采用HBTU/HOBt/DIEA方法,但是目前采用該方法合成磷酸化也有缺點,特別是在合成多磷酸化多肽或長肽的時候,連接效率低,后產(chǎn)品純度很低,對于這種磷酸化多肽,我們考慮采用后磷酸化方法,其合成過程就是在多肽合成結(jié)束后,選擇性脫去要標記的氨基酸的側(cè)鏈保護基,對于Tyr,Thr可以直接使用側(cè)鏈不保護的氨基酸進行反應,而Ser可以采用Fmoc-Ser(trt),在1% TFA/DCM條件下可以定量的脫除。后磷酸化,采用雙芐基亞磷酰胺,四氮唑生成亞磷酰胺四唑活性中間體,連接到羥基上,隨后在過氧酸下氧化生成磷?;?,完成反應。
常用修飾和標記
N端標記或修飾
N端乙?;ˋC)
N端生物素標記(Biotin)
N端脂肪酸修飾(Pal, Myr)
N端羅丹明標記(Rodamine B)
N-FITC
N-5-FAM
N-BODIPY FL
N-Merocyanine 540
HYNIC
C端標記或修飾
C端酰胺化
C-端生物素標記 (用賴氨酸側(cè)鏈連接)
C-FITC (用賴氨酸側(cè)鏈連接)
C-AMC
C-AFC
磷酸化標記
p-Tyr
p-Ser
p-Thr
環(huán)化
二硫鍵環(huán)肽(S-S)
多肽首尾酰胺環(huán)
多肽蛋白偶聯(lián)
KLH偶聯(lián)
BSA偶聯(lián)
含特殊氨基酸
D-amino acids
Cit,Aib,Abu,Ahx
Lys(Ac)
Lys(Me), Lys(Me2), Lys(Me3)
MAP 復合抗原肽
MAP4 4分支
MAP8 8分支
MAP16 16分支
國肽生物主要提供:多肽合成、多肽定制、同位素標記肽、人工胰島素、磷酸肽、生物素標記肽、熒光標記肽(Cy3、Cy5、Fitc、AMC等)、目錄肽、偶聯(lián)蛋白(KLH、BSA、OVA等)、美容肽、化妝品肽、多肽文庫構(gòu)建、抗體服務、糖肽、訂書肽、藥物肽、RGD環(huán)肽等。詳情請咨詢國肽生物
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