農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀器試劑
【試劑配制】
① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500ml 蒸餾水中,溶解、混勻即可。
② 底物:按需添加的底物量,向標(biāo)有“底物”的試劑瓶中加入蒸餾水溶解、混勻即可。0~5oC環(huán)境下冷藏保存。
底物添加量為20ul時(shí),應(yīng)往標(biāo)注為底物的瓶中加入2.7ml蒸餾水;
底物添加量為100ul時(shí),應(yīng)往標(biāo)注為底物的瓶中加入13ml蒸餾水。
③ 顯色劑:無(wú)需配制放入冰箱冷藏(0~5℃),切勿冷凍結(jié)冰。
④ 酶試劑:酶試劑已配成溶液可直接使用。平常要在0~5oC環(huán)境條件下冷藏保存,切勿冷凍至結(jié)冰?。?!
農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀器試劑
【操作步驟】
1.樣品前處理:
(1) ①植株:稱取2g樣品(葉菜剪成寬度為1厘米的菜樣,塊根菜取1厘米左右的表皮樣品)放入三角瓶中,加入10ml緩沖液后,振蕩提取2分鐘;
②茶葉:稱取0.5g茶葉樣品,加入5ml丙酮,振蕩提取5分鐘;取0.2ml上述丙酮溶液,40~50℃水浴蒸干;加入2.5ml緩沖液,振蕩2分鐘;(自備丙酮)
(2) 若浸提液清澈無(wú)色或顏色較淺,取上清液待測(cè);
若浸提液混濁,離心,取上清液待測(cè);
若浸提液色素干擾嚴(yán)重,可用活性炭脫色,具體方法如下:
將浸提液轉(zhuǎn)移至另一個(gè)三角瓶中,加入0.1~0.5g活性碳(根據(jù)顏色深淺調(diào)整),水浴70℃加熱5分鐘,取出趁熱過(guò)濾,濾液待測(cè)。
[備注]:蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí),可采取整株(體)浸提,避免次生物物質(zhì)干擾。
2.檢測(cè)樣品的制備:
(1) 空白對(duì)照液:
①取酶100ul,緩沖液2.5ml,加入反應(yīng)瓶中,混勻靜置10分鐘后,再加入顯色劑100ul。
②加入底物20ul(或100ul);
③搖勻后立即測(cè)試。
(2) 檢測(cè)樣品液:
①取酶100ul,待測(cè)樣品液2.5ml,加入反應(yīng)瓶中,混勻靜置10分鐘后,再加入顯色劑100ul。
②加入底物20ul(或100ul);
③搖勻后立即測(cè)試。
3、檢測(cè)樣品測(cè)試:
(1) 空白對(duì)照測(cè)量:
① 取2.5ml對(duì)照樣品于比色皿中;
② 將比色皿放入的通道中;
③ 按“對(duì)照”鍵,屏幕下方顯示測(cè)量時(shí)間;
④ 檢測(cè)結(jié)束后,儀器自動(dòng)顯示對(duì)照樣品的測(cè)試結(jié)果△Ao。
[備注]:a 當(dāng)空白對(duì)照值在0.15-0.3之間時(shí),可繼續(xù)做實(shí)驗(yàn);
b 當(dāng)空白對(duì)照值在<0.15時(shí),需重做空白對(duì)照,若重復(fù)多次的空白對(duì)照值<0.15時(shí),必須更換酶試劑。
c 當(dāng)空白對(duì)照值在>0.3時(shí),要調(diào)試減少儀器的測(cè)量時(shí)間,重新做空白對(duì)照。
(2) 樣品測(cè)量:
① 取2.5ml待測(cè)樣品于比色皿中;
② 將比色皿放入的通道中;
③ 按“樣品”鍵,屏幕下方顯示測(cè)量時(shí)間;
④ 檢測(cè)結(jié)束后,儀器自動(dòng)顯示通道檢測(cè)樣品的測(cè)試結(jié)果△Ai。
【 判斷標(biāo)準(zhǔn)】
(1) 樣品的抑制率在40~50%之間為可疑農(nóng)殘超標(biāo)樣品;
(2) 抑制率>50%為農(nóng)殘超標(biāo)樣品,表明被測(cè)樣品的農(nóng)藥殘留毒性可能超過(guò)安全的界定標(biāo)準(zhǔn),建議用氣相色譜等儀器分析法作進(jìn)一步確認(rèn)。
【注意事項(xiàng)】
① 加入底物后,應(yīng)迅速混勻,立即測(cè)試。
② 測(cè)試前根據(jù)需添加底物的量對(duì)底物進(jìn)行稀釋:
③ 所用的檢測(cè)液對(duì)皮膚均具有不同程度的傷害,使用時(shí)請(qǐng)做好防護(hù)。不慎沾到皮膚應(yīng)立即擦干并用大量水沖洗。
檢測(cè)試劑請(qǐng)務(wù)必在2~4℃冰箱保存。