詳細介紹
德國NanoTemper蛋白質穩(wěn)定性分析技術(nanoDSF):PR.48
☆ 高通量:可同時測定48個樣品
☆ 超高數(shù)據(jù)分辨率:每個樣品采集超過1000個數(shù)據(jù)點
☆ 功能多樣:Tm、Ton、Tagg、Cm、△G、等溫穩(wěn)定性、變復性等
☆ 檢測濃度范圍廣:5 µg/ml 到250 mg/ml
☆ 樣品消耗量低:10 µL/樣品
☆ 檢測不受限制:無需染料,可在任何類型緩沖液中測定
☆ 運行成本低:耗材價格低、無維護費、非常簡單易操作
Prometheus NT.Plex主要參數(shù):
- 具有多個檢測模塊:雙紫外(Dual-UV, 330/350nm)檢測模塊和背向反射光(Backreflection optics)檢測模塊;
- 直接檢測蛋白質內(nèi)源熒光,測定時無需添加染料,不受緩沖液條件限制;
- 測定參數(shù):Tm、Ton、Cm、ΔG、Tagg;
- 可用于研究蛋白質等溫穩(wěn)定性和變溫穩(wěn)定性;
- 可測定蛋白樣品中變性成分的比例,用于質量控制;
- 檢測通量:每次24個樣品;
- 樣品體積:10 μL/樣品;
- 樣品濃度范圍:5 μg/mL - 250 mg/mL;
- 上樣方式:機械臂自動上樣;
- 溫控范圍:15-110℃,升溫速度:0.1-7℃/分鐘;
- 數(shù)據(jù)采樣率:每個樣品每分鐘≥20個數(shù)據(jù)點;
- 儀器無需定期更換配件,實驗完成后無需對儀器進行清洗維護
檢測原理:
nanoDSF是一種*的差示掃描熒光技術,具有超高分辨率,利用蛋白中色氨酸和酪氨酸自發(fā)熒光檢測其穩(wěn)定性。它廣泛應用于抗體工程、膜蛋白研究、制劑和質量控制等領域。蛋白中色氨酸和酪氨酸熒光受其所在微環(huán)境的影響很大,尤其是色氨酸熒光,蛋白結構的變化通常會影響其強度和發(fā)射波長。Prometheus 儀器配備的熒光檢測器可測定樣品在兩種波長(350 nm 和 330 nm)下的熒光強度,因而可以靈敏的檢測到蛋白去折疊過程中熒光強度和熒光峰值的變化。通過變性曲線可以得到蛋白穩(wěn)定性的重要參數(shù)。衡量目標蛋白的熱穩(wěn)定性可通過參數(shù)熔融溫度(Tm),即一半蛋白去折疊時的溫度。