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01徑向色譜技術(shù)
徑向流色譜柱流動(dòng)相攜帶樣品沿徑向遷移。在徑向流色譜柱內(nèi),流動(dòng)相和樣品可以從色譜柱的周圍流向柱圓心,也可以從柱圓心流向柱的周圍。
基于徑向流色譜技術(shù)。柱子有三個(gè)環(huán)形通道(如Figure.1),內(nèi)外通道橫截面積相等并將流體引至出口,中間通道裝載色譜填料。
Superflo®柱基于徑向流色譜技術(shù)。由于外通道的橫截面積較大且床層深度較低,所以Superflo®柱可支持非常高的流速和非常低的運(yùn)行壓力。
徑向工藝和傳統(tǒng)軸向工藝分離卵清蛋白的系統(tǒng)壓力比對(duì)
Peter R L? Large-scale ion-exchange column chromatography of proteins Comparison of different formats[J]?Journal of Chromatography B,2003,790:17~33
徑向?qū)游龉に嚕?/strong>Radial)運(yùn)行時(shí)的系統(tǒng)壓力顯著低于同體積的傳統(tǒng)軸向工藝(Axial),尤其是工藝放大后的高體積流速表現(xiàn)更佳。
與傳統(tǒng)色譜柱相比,徑向色譜優(yōu)勢(shì)明顯,具體如下:
反壓更低、流速更快,層析時(shí)間節(jié)省4倍以上
易于放大,放大后占地更小
更好的柱效及分離趨勢(shì)
防止?jié)舛纫蕾嚦恋砗偷鞍捉到猓岣呤章?/p>
易于使用,無需拆卸即可實(shí)現(xiàn)填料安裝和卸除
02徑向色譜有多快
案例1:陰離子交換分離大腸桿菌表達(dá)胞內(nèi)酶
Courtesy:Genencor Corp
圖中可見,徑向色譜層析時(shí)間相對(duì)于傳統(tǒng)軸向色譜縮短了約7倍,并且處理了更大體積的樣品,效率獲得巨大提升。
案例2:徑向工藝和傳統(tǒng)軸向工藝疏水層析柱分離蛋白比對(duì)
Courtesy:University of Nebraska
表中可見,傳統(tǒng)軸向工藝層析時(shí)間是徑向工藝的18倍。
03徑向流技術(shù)的高流速會(huì)影響載量嗎?
填料動(dòng)態(tài)載量受到結(jié)合流速影響,徑向色譜技術(shù)得益于其設(shè)計(jì)可以大幅提升線性速度,但這是否會(huì)帶來動(dòng)態(tài)載量的顯著下降?答案是否定的,請(qǐng)見以下數(shù)據(jù)。
4種填料對(duì)于徑向色譜保留時(shí)間的測(cè)試
使用圖中4種填料進(jìn)行徑向色譜保留時(shí)間的測(cè)試,保留時(shí)間分別設(shè)置2、4、8min,數(shù)據(jù)如下所示:
表中可見,保留時(shí)間由8min降低至2min, 效率提升4倍,動(dòng)態(tài)載量依然保持在80%左右,另外個(gè)別廠商裝柱高度較高,反壓大,保留時(shí)間甚至超過10min, 這種情況使用徑向色譜具有更加廣闊的效率提升空間。
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