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純化快槍手-徑向色譜技術(shù)

來源:廣州市艾貝泰生物科技有限公司   2022年11月22日 17:43  

01徑向色譜技術(shù)

徑向流色譜柱流動(dòng)相攜帶樣品沿徑向遷移。在徑向流色譜柱內(nèi),流動(dòng)相和樣品可以從色譜柱的周圍流向柱圓心,也可以從柱圓心流向柱的周圍。

基于徑向流色譜技術(shù)。柱子有三個(gè)環(huán)形通道(如Figure.1),內(nèi)外通道橫截面積相等并將流體引至出口,中間通道裝載色譜填料。

 

Superflo®柱基于徑向流色譜技術(shù)。由于外通道的橫截面積較大且床層深度較低,所以Superflo®柱可支持非常高的流速和非常低的運(yùn)行壓力。
 

徑向工藝和傳統(tǒng)軸向工藝分離卵清蛋白的系統(tǒng)壓力比對(duì)

Peter R L? Large-scale ion-exchange column chromatography of proteins Comparison of different formats[J]?Journal of Chromatography B,2003,790:17~33

 

徑向?qū)游龉に嚕?/strong>Radial)運(yùn)行時(shí)的系統(tǒng)壓力顯著低于同體積的傳統(tǒng)軸向工藝(Axial,尤其是工藝放大后的高體積流速表現(xiàn)更佳。

與傳統(tǒng)色譜柱相比,徑向色譜優(yōu)勢(shì)明顯,具體如下:

  • 反壓更低、流速更快,層析時(shí)間節(jié)省4倍以上

  • 易于放大,放大后占地更小

  • 更好的柱效及分離趨勢(shì)

  • 防止?jié)舛纫蕾嚦恋砗偷鞍捉到猓岣呤章?/p>

  • 易于使用,無需拆卸即可實(shí)現(xiàn)填料安裝和卸除

 


02徑向色譜有多快

案例1:陰離子交換分離大腸桿菌表達(dá)胞內(nèi)酶

 

微信圖片_20221118124909.png

 

CourtesyGenencor Corp

圖中可見,徑向色譜層析時(shí)間相對(duì)于傳統(tǒng)軸向色譜縮短了約7倍,并且處理了更大體積的樣品,效率獲得巨大提升。

 

案例2:徑向工藝和傳統(tǒng)軸向工藝疏水層析柱分離蛋白比對(duì)

CourtesyUniversity of Nebraska

表中可見,傳統(tǒng)軸向工藝層析時(shí)間是徑向工藝的18倍。

 

03徑向流技術(shù)的高流速會(huì)影響載量嗎?

填料動(dòng)態(tài)載量受到結(jié)合流速影響,徑向色譜技術(shù)得益于其設(shè)計(jì)可以大幅提升線性速度,但這是否會(huì)帶來動(dòng)態(tài)載量的顯著下降?答案是否定的,請(qǐng)見以下數(shù)據(jù)。

4種填料對(duì)于徑向色譜保留時(shí)間的測(cè)試

使用圖中4種填料進(jìn)行徑向色譜保留時(shí)間的測(cè)試,保留時(shí)間分別設(shè)置2、4、8min,數(shù)據(jù)如下所示:

表中可見,保留時(shí)間由8min降低至2min, 效率提升4倍,動(dòng)態(tài)載量依然保持在80%左右,另外個(gè)別廠商裝柱高度較高,反壓大,保留時(shí)間甚至超過10min, 這種情況使用徑向色譜具有更加廣闊的效率提升空間。

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