防脫片又叫防脫載玻片、離子修飾玻片和細胞捕獲玻片等,是用化學(xué)或物理方法進行載玻片或蓋玻片的表面修飾,常用于細胞培養(yǎng)、病理學(xué)組織和細胞制片、液基細胞學(xué)薄層制片,以防止操作過程中細胞或組織掉片現(xiàn)象的發(fā)生。
產(chǎn)品規(guī)格:76x26mm,1~1.2mm,50片/盒
防脫片分類
防脫片可分為:普通防脫載玻片、離子修飾玻片、正電荷玻片、負電荷玻片、醛化玻片、硅化玻片、氨基化玻片和細胞捕獲玻片等。而玻片載體可以用載玻片、蓋玻片、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶等。
防脫片成分
防脫片的成分為載玻片(蓋玻片)、玻片修飾劑(黏附劑),常用的黏附劑有APES(3-Aminopropyl-Triethoxysilane 3-氨丙基-3-乙氧基甲硅烷)、多聚-L-賴氨酸(Poly-L-Lysine)、明膠、蛋清等。細胞學(xué)常用黏附劑為APES和多聚-L-賴氨酸 ,組織學(xué)常用明膠、蛋清等。
防脫片的應(yīng)用
防脫片用于細胞培養(yǎng)、病理學(xué)組織和細胞制片、液基細胞學(xué)薄層制片,尤其是在液基細胞學(xué)薄層制片中防脫片的質(zhì)量至關(guān)重要,而多聚左旋賴氨酸為目前免疫組織化學(xué)染色中zui常用的防脫片劑,適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如效果不佳,可用雙重處理(APES和poly-l-lysine)的切片。在以上兩種方法均無效的情況下,可用如下方法:切片在脫蠟前放在APES l:50丙酮溶液中浸泡3分鐘,晾干后即可進行下一步驟。
目前在細胞培養(yǎng)、病理學(xué)組織和細胞制片、液基細胞學(xué)薄層制片的應(yīng)用中,細胞捕獲玻片使用zui廣,附著力強、粘附的細胞多。
防脫片常用制備方法
一、載玻片和蓋玻片的處理
將載玻片或培養(yǎng)用的小蓋片浸泡在重鉻酸鉀濃硫酸清潔液中24小時,然后流水充分沖洗,再用蒸餾水沖洗3遍以上,而后置95%乙醇中12小時。取出擦干或烤干,貯放于玻片盒內(nèi)備用。蓋玻片很薄,以上處理程序必須縮短時間,清潔液浸泡只需2小時,流水沖洗注意勿損傷玻片。
二、常用黏附劑的使用
1.多聚左旋賴氨酸(poly-1-lysine)
首先配制0.1%(ω/υ)多聚左旋賴氨酸濃縮液,室溫下(18~26℃)可保存1年。使用時,將試劑10倍稀釋成工作液,濃度為0.01%(ω/υ),2-8℃冰箱保存,有效期3個月。使用方法是將充分洗凈和預(yù)先干燥的玻片浸泡于稀釋后的多聚左旋賴氨酸溶液數(shù)十秒或提拉十次,瀝干.于室溫下晾干12-24小時或在45℃以下烤箱內(nèi)烘干。處理后的玻片避光干燥可保存三個月。
2.APES(3-氨丙基-乙氧基甲硅烷)
APES必須現(xiàn)用現(xiàn)配。用此方法黏合的玻片應(yīng)垂直烤片而不能水平烤片,否則,組織片中易出現(xiàn)氣泡。 APES的使用方法:用丙酮50倍稀釋(APESl份、丙酮49份混合),將洗凈的玻片放人稀釋好的APES中,停留20~30秒,取出稍停,再人純丙酮或蒸餾水中涮去未結(jié)合的APES。置通風(fēng)櫥中晾干即可。注意用APES防脫片處理的載玻片撈片時組織應(yīng)一步到位.并盡量減少氣泡存在,以免影響染色結(jié)果。注意不要將APES與其他防脫片劑混合使用。