鼠疫菌抗原快速檢測試劑(膠體金法)
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【原理和用途】
鼠疫菌是人和嚙齒動物易感的病原菌,具有較強(qiáng)的抵抗力,如在水、肉湯和潮濕的谷物中可存活數(shù)周,在0℃可存活數(shù)月至數(shù)年,在干痰、蚤類排泄物和埋葬的尸體中也可存活一段時間。人或動物感染鼠疫后,其淋巴液、血清和尿液中可含有鼠疫菌抗原。本試劑采用雙抗體夾心法,將抗鼠疫菌特異性抗體包被在硝酸纖維素膜上,用于捕捉標(biāo)本中的鼠疫菌抗原,然后用特異性抗體標(biāo)記的免疫膠體金探針進(jìn)行檢測。
本試劑用于環(huán)境、污染物和臨床標(biāo)本中鼠疫菌抗原的檢出,也可用于純培養(yǎng)鼠疫菌的鑒定。臨床標(biāo)本中,淋巴液的檢出率高于血清。
【操作步驟】
- 對不同來源的標(biāo)本,制備樣品檢驗(yàn)液。
(1)純培養(yǎng)細(xì)菌----挑取疑似鼠疫菌單個菌落,于小試管中制成0.5ml鹽水菌懸液作為檢測液。
(2)臨床標(biāo)本----取疑似鼠疫患者或病畜腹股溝淋巴結(jié)針刺吸出物、腦脊液和血清標(biāo)本,用鹽水1:1稀釋后作為檢測液;或取死亡動物、患者尸體肝脾研磨標(biāo)本,加少量鹽水充分振搖,離心或自然沉降后取上清0.5ml作為檢測液。
(3)環(huán)境中污染物----取疑似鼠疫菌污染的土壤、灰塵,或物體表面、動物皮毛的擦拭子,浸于1ml鹽水中,自然沉降后或擠干擦拭子,取上清作為檢測液,或取疑似污染水0.3ml作為檢測液。
2、取試劑一個,撕開外包裝,吸取上述樣品檢測液,滴加3~4滴(約0.2ml)于試劑圓孔中,2分鐘后開始觀察結(jié)果,10分鐘終止觀察。
【結(jié)果判定】
陽性結(jié)果:試劑顯示窗口“C”(對照)和“T”(檢測)處出現(xiàn)2條紅色沉淀線為鼠疫菌抗原檢出陽性。
陰性結(jié)果:試劑顯示窗口“C”處出現(xiàn)1條紅色沉淀線為鼠疫菌抗原檢出陰性。
試劑失效:試劑顯示窗口“C”處未出現(xiàn)紅色沉淀線,此情況下無論“T”處是否出現(xiàn)沉淀線,均判為試劑失效。
【注意事項(xiàng)】
- 本試劑zui低可檢出鼠疫菌105~106CFU/ml,或檢出鼠疫F1抗原1ng/ml。為提高檢出率,應(yīng)盡量使樣品濃縮。對于高度可疑但檢測陰性的樣品應(yīng)進(jìn)行鼠疫菌分離。
- 標(biāo)本中固相化雜質(zhì)太多時(如動物臟器標(biāo)本)離心取上清檢測,否則會影響層析效果,出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。
- 試劑取出后應(yīng)立即使用,以保證試劑使用時干燥,因?yàn)樵噭┰诳諝庵斜┞稌r間過長會受潮失效。
- 試劑用過后放入包裝袋中,集中消毒后再處理,以防污染環(huán)境。
【規(guī)格】1人份/包裝
【貯藏】室溫避光保存,不得凍存。
【有效期】2年