雞戊糖素(PTD) ELISA 試劑盒
樣品準(zhǔn)備
1. 手術(shù)取出動(dòng)物組織,并秤重以確定200毫克組織重量
2. (選擇步驟)放進(jìn)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
3. (選擇步驟)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次
4. 即刻用刀片切碎組織
5. 放進(jìn)一個(gè)預(yù)冷的15毫升錐形離心管
6. 加入預(yù)冷的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 渦旋震蕩5秒,充分混勻
8. 即刻放入預(yù)冷的DOUNCE勻漿器,在冰槽里用勻漿棒勻化組織(約40至80下)
9. 將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管
10. 放進(jìn)4℃臺(tái)式離心機(jī)離心10分鐘,速度為10000g
11. 移取500微升到新的1.5毫升離心管
12. 加入xx微升 穩(wěn)定液(Reagent B),混勻
13. 放在冰槽里待測(cè)(注意:須1周內(nèi)使用)
雞戊糖素(PTD) ELISA 試劑盒
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
雞戊糖素(PTD) ELISA 試劑盒
常用標(biāo)簽包括有Flag、myc、HA、His、GST、GFP、MBP等。
Flag標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)短的親水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目標(biāo)蛋白;其純化條件是非變性的,因此可以純化所有有活性的融合蛋白。
His標(biāo)簽是由6個(gè)組氨酸(His-His-His-His-His-His)組成的短肽,專門設(shè)計(jì)用于重組蛋白的吸附純化。由于分子量小,且較容易分離和純化,是目前使用廣泛的一種。
GST標(biāo)簽體系具有蛋白表達(dá)率高,表達(dá)產(chǎn)物純化方便,利于GST抗體制備的特點(diǎn)。GST融合蛋白在水溶液中可溶,可從細(xì)菌裂解液中提取,在不變性的條件下通過親和層析得到。
GFP或其突變體EGFP等廣泛用于基因表達(dá)效率的檢測(cè),以及和目的蛋白融合表達(dá)用于檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)和分別。GFP抗體不經(jīng)可以檢測(cè)GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w,也可以檢測(cè)和GFP或其適當(dāng)?shù)耐蛔凅w融合表達(dá)蛋白的表達(dá),以及純化、定性或定量檢測(cè)GFP融合表達(dá)蛋白等。
Myc標(biāo)簽(序列為:EQKLISEEDL)已成功應(yīng)用于WB雜交技術(shù)、免疫沉淀IP和流式細(xì)胞術(shù)中。因此可用于檢測(cè)重組蛋白在細(xì)菌、酵母、昆蟲細(xì)胞和哺乳細(xì)胞中的表達(dá)情況。Myc重組蛋白質(zhì)可通過偶聯(lián)Myc標(biāo)簽抗體到活化的瓊脂糖上而進(jìn)行親和純化。但Myc重組蛋白的低pH洗脫條件往往會(huì)降低蛋白質(zhì)的活力,因此Myc標(biāo)簽系統(tǒng)廣泛應(yīng)用于檢測(cè)但很少用于純化。
HA標(biāo)簽系統(tǒng)利用一個(gè)HA(influenza hemagglutintin epitope:YPYDVPDYA)短肽融合到目標(biāo)蛋白。HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛應(yīng)用于多種細(xì)胞類型,相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛運(yùn)用。
MBP標(biāo)簽蛋白大小為40kDa,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可增加在細(xì)菌中過量表達(dá)的融合蛋白的溶解性,尤其是真核蛋白。如果蛋白在細(xì)菌中表達(dá),MBP可以融合在蛋白的N端或C端??捎肕BP抗體或表達(dá)的目的蛋白特異性抗體檢測(cè)MBP標(biāo)簽標(biāo)記的重組蛋白。
其余標(biāo)簽抗體還有V5、GFP、RFP、β-Actin、β-Tubulin、GAPDH、ERK1、AU1、Avi、B、CBP、DDDDK、E、E2、Glu-Glu、HAT、HPC4、HSV、KT3、KLH、MAT、Protein A、S、S1、SNAP、SRT、NWSHPQFEK、SUMO、T7、Tag-100、TAP、Trx、Ty1、TF、Universal、VSV-G等,但應(yīng)用相對(duì)較少。
~上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學(xué)試劑及試劑盒的高科技生物企業(yè)。
總部位于上海,并在全國設(shè)有經(jīng)銷或代理機(jī)構(gòu)。產(chǎn)品因可靠而穩(wěn)定的質(zhì)量和較為完善的售后服務(wù)確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產(chǎn)品為保障、以誠信為基礎(chǔ)、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念,擁有專業(yè)的研發(fā)和質(zhì)量檢測(cè)團(tuán)隊(duì)以及*的倉儲(chǔ)和物流系統(tǒng)。“篤瑪生物”已經(jīng)得到全國科研工作者的認(rèn)可,成為廣大經(jīng)銷商推崇的。
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