科研級蛋黃卵磷脂實(shí)驗(yàn)申報(bào)研發(fā)小試
科研級蛋黃卵磷脂實(shí)驗(yàn)申報(bào)研發(fā)小試
蛋黃卵磷脂Danhuang LuanlinzhiEgg Yolk Lecithin 【93685-90-6】
本品系以雞蛋黃或蛋黃粉為原料,經(jīng)適當(dāng)溶劑提取精制而得的磷脂混合物。按無水物計(jì)算,含氮(N)應(yīng)為1.75%~1.95%,磷(P)應(yīng)為3.5%~4.1%,磷脂酰膽堿不得少于68%,磷脂酰乙醇胺不得過20%,磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺總量不得少于80%。
【性狀】本品為乳白色或淡黃色粉末狀或蠟狀固體;具有輕微的特臭。
本品在乙醇、或石油醚(沸程40~60℃)中溶解,在丙酮和水中幾乎不溶。
酸值 本品的酸值(通則0713)應(yīng)不大于20.0。
碘值 本品的碘值(通則0713)應(yīng)為60~73。
過氧化值 取本品2.0g,精密稱定,置250ml碘瓶中,依法測定(通則0713),過氧化值應(yīng)不大于3.0。
皂化值 本品的皂化值(通則0713)應(yīng)為195~212。
【鑒別】(1)取本品0.1g,置坩堝中,加碳酸鈉-碳酸鉀(2:l)3g,混勻,微火加熱,產(chǎn)生的氣體能使?jié)櫇竦募t色石蕊試紙變藍(lán)。
(2)取鑒別(1)項(xiàng)下遺留的殘?jiān)s100mg,緩緩灼燒至炭化物全部消失,放冷,加水30ml,微熱使殘?jiān)芙?,濾過,濾液置試管中,滴加硫酸至無氣泡產(chǎn)生,再加硫酸4滴,加鉬酸鉀少許,加熱,應(yīng)呈黃綠色。
?。?)在磷脂酰膽堿和磷脂酰乙醇胺含量測定項(xiàng)下記錄的色譜圖中,供試品溶液主峰的保留時(shí)間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。
【檢查】游離脂肪酸對照品溶液的制備 稱取棕櫚酸0.512g,置50ml量瓶中,加正庚烷溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取2ml,置50ml量瓶中,用正庚烷稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 取本品約1g,精密稱定,置25ml量瓶中,加丙二醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。
測定法 精密量取供試品溶液和對照品溶液各1ml,分別置20ml具塞試管中,各加丙二醇-正庚烷-0.5mol/L硫酸溶液(40∶10∶1)混合溶液5.0ml,振搖1分鐘,放置10分鐘。供試品溶液管精密加正庚烷3ml和水3ml,對照品溶液管精密加正庚烷2ml和水4ml,密塞,上下翻轉(zhuǎn)10次,靜置至少15分鐘,使分層。分別精密量取上層液3ml,置10ml離心管中,加尼羅藍(lán)指示液(取尼羅藍(lán)0.04g,加水200ml,使溶解后,加正庚烷100ml振搖,棄去上層正庚烷。反復(fù)操作4次。取下層水溶液20ml,加無水乙醇180ml,混勻。本液置棕色瓶中,室溫下可存放1個(gè)月)1ml,在通氮條件下,用聚乙烯醇滴定液(0.01mol/L)滴定至溶液顯淡紫色。供試品溶液消耗聚乙烯醇滴定液(0.01mol/L)的毫升數(shù)不得大于對照品溶液消耗聚乙烯醇滴定液(0.01mol/L)的毫升數(shù)(1%)。
甘油三酸酯、膽固醇與棕櫚酸 取本品適量,加正己烷-丙二醇一水(40∶50∶8)混合溶液溶解并定量稀釋制成每1ml中含20mg的溶液,作為供試品溶液;另取甘油三酸酯、膽固醇與棕櫚酸對照品各適量,精密稱定,用上述混合溶液分別溶解并定量稀釋制成每1ml中各含0.6mg、0.6mg、0.2mg的甘油三酸酯、膽固醇、棕櫚酸的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn),吸取上述供試品溶液、甘油三酸酯對照品溶液與膽固醇對照品溶液各5μl,棕櫚酸對照品溶液1μl,分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上,以正己烷-冰羧甲纖維素鈉(70∶30∶1)為展開劑,置內(nèi)壁貼有展開劑濕潤濾紙的層析缸中,展開后,取出,晾干,噴以10%(W/V)硫酸銅稀磷酸(8%,W/V)溶液,熱風(fēng)吹干,在170℃干燥10分鐘,立即檢視。供試品溶液如顯與對照品溶液相應(yīng)位置的雜質(zhì)斑點(diǎn),其顏色與對照品溶液所顯的主斑點(diǎn)比較,不得更深(即甘油三酸酯不得過3%,膽固醇不得過2%,棕櫚酸不得過0.2%)。
殘留溶劑 取本品0.2g,置20ml頂空瓶中,加水2ml,密封,作為供試品溶液;另取乙醇、丙酮、石油醚與正己烷各適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋制成每lml中分別約含200μg、200μg、200μg、50μg、27μg的溶液,作為對照品溶液。照殘留溶劑測定法(通則0861)試驗(yàn),用聚苯乙烯-二乙烯基苯為固定液(或極性相近)的毛細(xì)管柱(HP-PLOT/Q,30m×0.53mm,40μm)為色譜柱;起始溫度為160℃,維持8分鐘,以每分鐘5℃的速率升溫至190℃,維持6分鐘;氫火焰離子化檢測器(FID);進(jìn)樣口溫度為250℃,檢測器溫度260℃。頂空瓶平衡溫度為80℃,平衡時(shí)間為45分鐘。各色譜峰的分離度應(yīng)符合要求。取供試品溶液與對照品溶液,分別頂空進(jìn)樣,記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算,含乙醇、丙酮、均不得過0.2%,石油醚不得過0.05%,正己烷不得過0.02%,總殘留溶劑不得過0.5%。
水分 取本品,照水分測定法(通則0832第一法1)測定,含水分不得過3%。