本網(wǎng)站銷售的所有產(chǎn)品均不得用于人類或動物之臨床診斷或治療，僅可用于工業(yè)或科研等非醫(yī)療目的。
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS63212 | NAD激酶（NADK）測試盒（比色法） | 100管/48樣 |
AS63212 | NAD激酶（NADK）測試盒（比色法） | 50管/24樣 |
正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
NADK（EC 2.7.1.23）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前所發(fā)現(xiàn)的生物體內(nèi)惟一能夠催化NAD+磷酸化生成NADP+的酶，可催化NAD(H)以ATP或無機(jī)多聚磷酸[poly(P)]作為磷?；w進(jìn)行磷酸化反應(yīng)，生成NADP(H)。因此，NAD激酶在合成NADP(H)以及調(diào)節(jié)NAD(H)與NADP(H)的平衡上具有重要作用。
測定原理：
NADK催化NAD+磷酸化，生成NADP+；NADP+可被6-磷酸葡萄糖脫氫酶還原為NADPH；在340 nm下測定NADPH增加速率?？煞从吵鯪ADK活性的大小。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體100 mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體25 mL×1瓶，4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存；
試劑四：粉劑×1瓶，-20℃保存；
樣本測定的準(zhǔn)備：
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液），超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟
1、分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、將試劑一和試劑二37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴15min以上。
3、工作液Ⅰ的配制：在試劑三中加入5mL試劑一，充分混勻待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
工作液Ⅱ的配制：在試劑四中加入18mL試劑二，充分混勻待用；用不完的試劑分裝后-20℃保存，禁止反復(fù)凍融；
4、加樣表
試劑名稱(μL) | 測定孔 | 對照管 |
樣本 | 20 | 20 |
工作液Ⅰ | 80 | |
試劑一 | 80 |
充分混勻，37℃（哺乳動物）或25℃（其它物種）水浴15min，立即煮沸
2min（蓋緊，防止水分散失）冰浴冷卻，10000g，25℃離心10min，取上清
上清液 | 40 | 40 |
工作液Ⅱ | 160 | 160 |
加完試劑混勻，室溫靜置15min，340nm下測定吸光值，ΔA=A測定-A對照。
NADK活性計(jì)算：
a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下
1、血清（漿）NADK活力的計(jì)算:
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=53.59×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NADK活力的計(jì)算:
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=53.59×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=53.59×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.107×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.02 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，15 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。
b.用96孔板測定的計(jì)算公式如下
1、血清（漿）NADK活力的計(jì)算:
單位的定義：每mL血清（漿）每分鐘生成1 nmol的NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min/mL）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷V樣÷T=107.18×ΔA
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中NADK活力的計(jì)算:
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算：
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min /mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=107.18×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算：
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min /g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W× V樣÷V樣總) ÷T=107.18×ΔA÷W
（3）按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：
單位的定義：每1萬個細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成1 nmol NADP定義為一個酶活力單位。
NADK（nmol/min /104 cell）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(500×V樣÷V樣總) ÷T=0.214×ΔA
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-4 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：96孔板光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.02 mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時間，15 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g；500：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500萬。
公司正在出售的產(chǎn)品：
D2R ELISA Kit | 1型1-磷酸鞘氨醇受體ELISA試劑盒 |
anti-cardiolipin antibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit | ADP核糖轉(zhuǎn)移酶5ELISA試劑盒 |
Ⅰ型前膠原氨基端肽ELISA試劑盒 | Bcl2樣蛋白11ELISA試劑盒 |
Archease蛋白ELISA試劑盒 | CopineⅡ蛋白ELISA試劑盒 |
大鼠降鈣素(CT)ELISA試劑盒 | 倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) 試劑盒 ELISA |
磷酸化糖原合酶激酶3βELISA試劑盒 | 豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA試劑盒 |
人白介素2受體(IL-2R)試劑盒ELISA | Calicin蛋白ELISA試劑盒 |
豬E選擇素(E-Selectin/CD62E)檢測試劑盒elisa | 嗜衣原體通用PCR試劑盒 |
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒 | 沃爾巴克氏菌通用PCR試劑盒 |
剛果錐蟲PCR試劑盒 | 太子參探針法PCR鑒定試劑盒 |
羅氏沼蝦諾達(dá)病毒PCR檢測試劑盒 | 鴿皰疹病毒1型PCR試劑盒 |
單胞菌通用PCR檢測試劑盒 | 17-OHCS 大鼠17羥皮質(zhì)類固醇ELISA檢測試劑盒 |
ATA 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體ELISA檢測試劑盒 | 伽氏疏螺旋體PCR試劑盒 |
AT 人抗胰蛋白ELISA檢測試劑盒 | 魏氏無綠藻PCR試劑盒 |
乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)ELISA試劑盒 | AsAb 大鼠抗精子抗體ELISA檢測試劑盒 |
采購中心
