生物技術(shù)的飛速發(fā)展,也讓生物資源的利用更加精準(zhǔn)和充分。人的血液是個巨大的寶庫,可以輔助疾病診斷與治療。隨著精準(zhǔn)醫(yī)療的提出,個體化診斷、CART治療、單克隆抗體治療等技術(shù)不斷成熟普及,血液的利用也越來越廣泛,尤其是特定成分的使用。血液經(jīng)離心分離,從上到下,可以獲得血漿、白膜層和紅細(xì)胞等。其中,白膜層的分離需要專業(yè)的技術(shù)和熟練的技巧,手工操作緩慢而繁瑣。
Beckman Biomek i5自動化工作站可以精準(zhǔn)定位、快速分離白膜層,使流程標(biāo)準(zhǔn)化,消除不同技術(shù)人員的操作差異,提高白膜層核酸提取的產(chǎn)量和質(zhì)量,并實現(xiàn)高通量樣品處理。
*掃描條形碼記錄樣本信息
*拍照模塊對進行拍照
*液面分析系統(tǒng)對紅細(xì)胞層、血漿層和白膜層進行高度分析
*分析結(jié)果上傳到Biomek軟件
*Biomek軟件根據(jù)分析系統(tǒng)結(jié)果進行液面高度確認(rèn)
*Biomek軟件根據(jù)白膜層高度,驅(qū)動加樣器進行白膜層分離
Biomek i5自動化工作站。該款工作站配置了靈活8通道加樣器、1個斜側(cè)抓板機械手、渦旋振蕩模塊、吸頭回放模塊以及拍照模塊。拍照和架模塊可根據(jù)需要進行拆卸,拆卸后可增加9個通用板位。分離96個樣本的白膜層需要約20min。
白膜層主要包括富含血小板區(qū)、富含淋巴細(xì)胞區(qū)、富含單核細(xì)胞區(qū)和富含粒細(xì)胞區(qū),粘度較大,使用1000ul寬口吸頭可以更好地吸取白膜層。
內(nèi)置轉(zhuǎn)圈吸液模板,限度模擬手工吸取白膜層操作,提高分離效率。
磁珠法白膜層核酸提取流程
白膜層核酸提取臺面布局舉例。96個樣本的白膜層核酸提取所需耗材:
(1)2盒100Ou吸頭,分別用于吸取試劑、白膜層和廢液。
(2)1盒20Oul吸頭,用于轉(zhuǎn)移洗脫后核酸。
(3)4個試劑槽,用于放置各種裂解液、洗滌液和洗脫液
(4)2個深孔板,分別作為提取板和廢液板。
(5)1個PCR板,用于存放提取后的核酸。
(6)1個磁力架,用于吸附磁珠。
Biomeki5 自動化工作站使用的耗材和試劑品牌開放,用戶可根據(jù)需要選擇國產(chǎn)或進口品牌的耗材和試劑,成本掌握在用戶手中。
靈活8通道移液器,每個通道均可獨立控制,間距可根據(jù)不同孔間距的耗材自動調(diào)整,可同時吸取不同體積的液體。
斜側(cè)抓板機械手,實現(xiàn)工作站內(nèi)及周邊耗材的搬運,斜側(cè)夾板屬性保證耗材搬運無局限性,充分利用臺面空間。
渦旋振蕩模塊,振速0-180ORPM。模塊上帶有自動夾板器及感應(yīng)裝置,樣品板在被夾板器固定后才進行高速振蕩,過程安全可靠。
拍照模塊,具備兩個高清拍照鏡頭,可以對不同高度的紅細(xì)胞層、白膜層、血漿層進行識別及定位,LED燈用于拍照過程的光補償。
獨立孔結(jié)構(gòu)吸頭盒,每個吸頭都有獨立的存放空間,可自動將用過的吸頭回放至原吸頭盒的原孔中,不會發(fā)生氣溶膠交叉污染,在實驗設(shè)計允許的情況可重復(fù)使用,節(jié)約成本。
Table.1 白膜層核酸提取結(jié)果。起始樣本為8個白膜層樣本各200u利用 GenFind V2 盒通過磁珠法進行核酸提取,用Nanodrop檢測核酸濃度和純度。從上表測得的結(jié)果可以看出,Biomek工作站提取核酸的濃度、純度良好。