在體光纖記錄系統(tǒng)Photometry是用LED光源激 發(fā)后通過CCD Camera記錄細(xì)胞光信號的系統(tǒng); 它對光信號記錄靈敏,實驗操作更為簡單,容易上 手。Photometry必須與CineLyzer結(jié)合使用、它是可以直接添加進CineLyzer系統(tǒng)的一個模塊,能夠 動物行為和光信號實時的結(jié)合起來進行監(jiān)測和分析。
光纖記錄的目的是實時檢測細(xì)胞的活性變化?;?于鈣離子濃度變化的熒光成像技術(shù)被廣泛用來記 錄神經(jīng)元活性。以 GFP 為例,鈣離子濃度敏感蛋 白 GCaMP 通過熒光信號強度變化可以很好地表 征神經(jīng)元的活性,其中 GCaMP6 具有很高的時間 靈敏度和熒光信號信噪比。將 GCaMP 表達到神經(jīng) 元中,然后通過光纖激發(fā) GCaMP 的熒光并實時監(jiān) 測記錄熒光信號強度的方法即光纖記錄。
Photometry系統(tǒng)特點
一套系統(tǒng)即可記錄單只動物的多個位點,又可同時 同步的記錄多只動物。 可以和視頻追蹤系統(tǒng)整合起來。 基于Camera的光纖記錄,而非光檢器。 GFP指示劑,如GCaMP6;RFP指示劑,如R-CaMP2 (可選)。
Multi-Fiber Photometry的創(chuàng)新點
用CCD Camera來記錄光纖束的光信號,不用借助 于其他外設(shè)就能直接根據(jù)需要增加通道數(shù)。Plexon 的在體光纖記錄系統(tǒng)(Photometry)是用LED光源 激發(fā)后通過CCD Camera記錄細(xì)胞光信號的系統(tǒng)。 光纖跳線包含了數(shù)個單根光纖,末端可連接埋植入 被試動物的多個目標(biāo)腦區(qū)、或者可以埋植入不同的 被試動物中。激發(fā)光源投射到光纖束末端,激發(fā)光 順著每一根光纖跳線進入每個個體特定的腦區(qū)內(nèi); 目標(biāo)腦區(qū)的熒光蛋白吸收激發(fā)光后、將發(fā)出活動依 賴性的被激發(fā)光信號,被激發(fā)光順著光纖跳線傳回 CCD Camera。
與CineLyzer行為記錄系統(tǒng)緊密結(jié)合
在體光纖記錄系統(tǒng)(the Multi-Fiber Photometry System)必須與CineLyzer結(jié)合使用、它是可以直接添加進 CineLyzer系統(tǒng)的一個模塊,能夠動物行 為和光信號實時的結(jié)合起來進行監(jiān)測和分 析。CineLyzer行為學(xué)系統(tǒng)提供被試動物的行為視 頻記錄,包含了動物運動的速度、位置、運動軌跡 等數(shù)據(jù)。CineLyzer還能自定義實驗區(qū)域和目標(biāo)區(qū) 域,計算被試動物進出目標(biāo)區(qū)域的次數(shù)、滯留時間 和順序等等。還能在被試動物身上定義一個運動的 區(qū)域,可用于分析不同被試之間的社交行為。因 此,Photometry作為CineLyzer的一個模塊,能夠合理地將光信號和被試做任務(wù)時的行為表現(xiàn)結(jié)合起 來,更利于實驗研究的需求。