pTOPO-TA-Blunt Simple Kit

產(chǎn)品介紹：

     本制品和傳統(tǒng)的T4連接酶原理不同，它利用了Topoisomerase可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）、高效連接DNA片段的原理采用本公司工藝制成。

1. 可以在瞬間（幾秒鐘-幾分鐘）完成任意PCR產(chǎn)物（兼容A末端/平末端）連接。

2. 特制的新型載體質(zhì)粒大小不到2kb，充分發(fā)揮了TOPO載體越小，可容納片段越大的優(yōu)勢，大限度提高了大片段連接效率；連接后質(zhì)粒大小比傳統(tǒng)載體小2kb以上，質(zhì)粒越小，轉(zhuǎn)化效率越高，極大的提高了各種片段連接后的轉(zhuǎn)化子數(shù)量。

3. 采用氨芐抗性載體只需10分鐘復蘇時間，比卡那抗性載體1小時復蘇時間縮短6倍。

4. zui快可以不用冰浴和熱休克，室溫5分鐘內(nèi)完成轉(zhuǎn)化；無需1小時復蘇，只需37℃10分鐘復蘇便可以涂板。從連接到涂板zui快只需15-20分鐘。

5. 自sha基因零背景原理，無自連假陽性，無需繁瑣藍白斑篩選和菌落PCR篩選。大部分情況下隨機挑一個克隆便是有插入的。

6. 連接長片段能力遠超傳統(tǒng)TA/Blunt克隆載體，可連接長達10kb片段（例如連接5kb片段，也可能達到挑10個菌落，至少8個是有插入的效果），是新一代的簡單、快速、零背景免篩選的TOPO TA/Blunt克隆載體。

本制品在克隆插入位點兩側(cè)不含多克隆酶切位點（Simple），需要時可在PCR 擴增引物上導入合適的酶切位點。此時如果使用PCR 擴增引物導入的酶切位點進行酶切時，酶切反應將不會受到載體上其它多克隆酶切位點影響，可提高酶切效率，增加亞克隆成功率。

注意：測序只能采用M13F/M13R 通用引物測序（見后面圖譜），但是不能采用M13(-47)/M13(-48)通用引物測序。菌落PCR 可使用和測序相同的引物。