PCR實驗外包服務(wù):
PCR起源:熒光定量PCR是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù),該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針來實現(xiàn)其定量功能的,與變通PCR相比,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點。與普通PCR相比。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Radix clematidis |
規(guī)格 | 50次 |
?【儲存條件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融,有效期6個月。
【適用儀器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等熒光定量PCR儀。
【樣本采集、存放及運輸】:
u 樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
u 存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(多凍融3次);
u 運輸:采用或泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
【自備試劑】:
核酸提取試劑,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini試劑盒,也可選擇其他合適的核酸提取產(chǎn)品。
組成及試劑配制:
1、 酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
?實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
C反應(yīng)蛋白CRP測定試劑盒
人狀腺受體相互作用蛋白6 (ELISA)試劑盒
類風(fēng)濕因子試劑R2
人狀腺素 (ELISA)試劑盒
鐵蛋白測定試劑盒
人間變性淋巴瘤激酶 (ELISA)試劑盒
C反應(yīng)蛋白檢測試劑R1
人間皮素 (ELISA)試劑盒
幽門螺桿菌抗體檢測試劑校準(zhǔn)品水平4
人堿性成纖維細(xì)胞生長因子 (ELISA)試劑盒
威靈仙探針法PCR鑒定試劑盒L-蛋氨酸(硫氨酸)高純,98%ELISA Kit for Serine Dehydratase (SDS)
L-蛋氨酸(硫氨酸)試劑級,99%ELISA Kit for Selenocysteine Lyase (SCLY)
L-蛋氨酸(硫氨酸)試劑級,99%ELISA Kit for Scinderin (SCIN)
D-硫氨酸試劑級,99%ELISA Kit for Suprabasin (SBSN)
D-硫氨酸高純,99%ELISA Kit for Sarcoma Antigen 1 (SAGE1)
D-硫氨酸高純,99%ELISA Kit for Rotatin (RTTN)
D-硫氨酸高純,99%ELISA Kit for Retbindin (RTBDN)
DL-蛋氨酸(硫氨酸)高純,99%ELISA Kit for Restin (RSN)
技術(shù)參數(shù):
1. 符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 1686-2005《新城疫病毒中強毒株檢測方法:熒光RT-PCR法》的檢測要求,可用于禽肉、禽類組織臟器、禽類排泄和分泌物,及其泄殖腔和咽喉拭樣中新城疫病毒的檢測。
2. 靈敏度:對于接種的雞胚尿囊液,檢測的zui高稀釋度可達(dá)10-8~10-7,與雞胚病毒分離方法的靈敏度接近。定量檢測線性范圍可達(dá)10-1010拷貝/ml。
3. 特異性:采用基因序列數(shù)據(jù)庫設(shè)計,并通過系統(tǒng)驗證,新城疫病毒RT-PCR能夠檢測所有已知新城疫病毒毒株。對于其它禽類感染因子,本試劑盒檢測結(jié)果為陰性。
4. 產(chǎn)品盒組成:(不包括新城疫病毒RNA提取試劑,用戶可采用通用型病毒RNA提取試劑盒或試劑盒推薦的提取方法。) 組成成份(48T/kit) 規(guī)格 數(shù)量 RNA提取液 30ml 1瓶 DEPC水 5 ml 1瓶 新城疫病毒RT-PCR一步法反應(yīng)液 920ul 1管 逆轉(zhuǎn)錄酶(5U/ul) 48ul 1管 Taq HS酶(5U/ul) 24ul 1管 新城疫病毒陽性對照 100ul 1管新城疫病毒陰性對照 100ul 1管 使用說明書 一份。