HEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞
名稱 | HEC-1-B (人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確) |
別稱 | Hec-1-B; HEC-1B; HEC1-B; HEC1B; Hec1B |
種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
生長培養(yǎng)基 | MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃ |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
背景描述 | HEC-1-B細(xì)胞是由H·Kuramoto于1968年分離的HEC-1-A細(xì)胞亞株。不同于HEC-A-1的是:HEC-1-B細(xì)胞在培養(yǎng)第135天到190天之間表現(xiàn)出穩(wěn)定的生長周期,且重現(xiàn)扁平,與親本細(xì)胞系相比更具鋪路石樣。此外,HEC-1-B細(xì)胞的主要染色體組是親本細(xì)胞的兩倍。 |
年齡(性別) | 女;71歲 |
組織來源 | 子宮內(nèi)膜腺癌 |
細(xì)胞類型 | 腫瘤細(xì)胞 |
腫瘤類型 | 子宮內(nèi)膜腺癌 |
生物安全等級 | 1 |
致瘤性 | Yes, in nude mice (The cells form moderately well differentiated adenocarcinomas consistent with endometrial carcinoma (grade II)).Yes, in the cheek pouch of cortisone treated hamsters (The cells form typical papillary adenomas). |
抗原表達(dá)情況 | Blood Type B; Rh+ |
保藏機構(gòu) | ATCC; HTB-113 JCRB; JCRB1193 JCRB; NIHS0480 |
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min,棄去上清液,加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中,加入約8 mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,使消化液浸潤所有細(xì)胞,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中,1000 rpm離心5 min,棄去上清液,補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3) 細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液,裝入無菌離心管中,1000 rpm條件下離心4 min,棄去上清液,用PBS清洗一遍,棄盡PBS,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液,使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL,輕輕混勻,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識。將凍存管放入-80℃冰箱,24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
三、培養(yǎng)注意事項
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由 客戶自行承擔(dān)。
3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞,再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min,用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞 的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1:2 傳代。
9. 注意: 1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。
公司正在出售的產(chǎn)品:
E ELISA Kit | 貓皰疹病毒1型PCR試劑盒 |
V-Yes-1 Yamaguchi Sarcoma Viral Related Oncogene Homolog(LYN)ELISA Kit | 戊糖片球菌PCR試劑盒 |
A Disintegrin And Metalloprotease 33,ADAM33 ELISA Kit | 回歸熱疏螺旋體PCR檢測試劑盒 |
PAPP-A ELISA Kit | 伊麗莎白巴爾通體PCR檢測試劑盒 |
PGE1 ELISA Kit | 北沙參探針法PCR鑒定試劑盒 |
Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2(ACAT2)ELISA Kit | 豬多殺性巴氏桿菌PCR試劑盒 |
AQP-0 ELISA Kit | 豬流行性腹瀉病毒PCR檢測試劑盒 |
X-Transporter protein 3(Xtrp3)ELISA Kit | 斑點氣單胞菌PCR檢測試劑盒 |
acidic fibroblast growth factor 1,aFGF-1 ELISA Kit | 斑石鯛虹彩病毒PCR檢測試劑盒 |
Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 7A(WNT7A)ELISA Kit | 豬鏈球菌細(xì)胞外蛋白因子(EPF)毒su基因PCR檢測試劑盒 |
EL ELISA Kit | FSH 小鼠促卵泡suELISA檢測試劑盒 |
V-Myb Myeloblastosis Viral Oncogene Homolog(MYB)ELISA Kit | 5-HT 大鼠5羥色胺ELISA檢測試劑盒 |
Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 10B(WNT10B)ELISA Kit | HEC-1-B人子宮膜腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族M成員1(TRPM1)ELISA試劑盒 |
ACA-IgA ELISA Kit | 5羥二十碳四烯suan(5-HETE)ELISA試劑盒 |
A Disintegrin And Metalloprotease 19(ADAM19)ELISA Kit | 6-keto-PGF1a 人6酮前列腺suF1aELISA檢測試劑盒 |