偽狂犬病毒抗體檢測試劑盒說明書
產(chǎn)品咨詢:
【原理】
豬偽狂犬是由偽狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)引起的家畜和多種野生動物發(fā)生一種急性傳染病。該病以發(fā)熱、奇癢、呼吸和神經(jīng)系統(tǒng)疾病為主要特征?;疾游锊∷缆矢?,但成年豬死亡率低,也不發(fā)生奇癢,妊娠母豬可導(dǎo)致流產(chǎn)、產(chǎn)死胎和木乃伊胎,新生仔豬和斷奶仔豬死亡率較高。檢測特異性抗豬偽狂犬病毒抗體,可作為豬場偽狂犬疫苗的免疫監(jiān)測及該病輔助檢測指標(biāo)。
本試劑盒采用ELISA方法檢測豬血清中特異性抗偽狂犬病毒IgG抗體。本試劑靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,操作方便快速,可分多次使用。
【試劑組成】
1.預(yù)包被板 | 48T/96T; |
| 7. 終止液(6號液) | 1支; |
2.酶結(jié)合物(1號液) | 1支; |
| 8. 陽性對照品 | 1支; |
3.濃縮洗滌液(2號液) | 1支; |
| 9. 陰性對照品 | 1支; |
4.底物(3號液) | 1支; |
| 10.不干膠膜 | 1/2片; |
5.顯色劑(4號液) | 1支; |
| 11.自封袋 | 1個(gè); |
6.樣本稀釋液(5號液) | 1支; |
| 12.使用說明書 | 1份; |
【操作程序】
1.洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液(2號液)按1:10稀釋,如取50ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。
2.樣本稀釋 用樣本稀釋液(5號液)將待檢血清樣本按1:100稀釋,如取5ul樣本與495ul樣本稀釋液,混勻。陰性、陽性對照品不用稀釋,直接加樣。
3.加樣反應(yīng) 每次試驗(yàn)設(shè)陰性對照2孔、陽性及空白對照各1孔(分別加入陰性、陽性對照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后,甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿工作洗滌液洗滌3次,每次均需停留1分鐘后再甩凈,拍干。
4. 加酶反應(yīng) 除空白對照孔外,每孔加酶結(jié)合物(1號液) 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后,甩去孔內(nèi)液體,如上洗滌,拍干。
5.顯色反應(yīng) 加底物液(3號液)和顯色劑(4號液)各1滴,混勻,37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號液)1滴,終止反應(yīng)(加終止液后,藍(lán)色會變?yōu)辄S色)并判讀結(jié)果。
【結(jié)果判斷】
陰性對照呈無色或淺黃色,陽性對照呈明顯黃色,表示試驗(yàn)有效。
以空白對照調(diào)零,用酶標(biāo)儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度(A值)。待檢孔A值大于陰性對照A值平均值的2.1倍者判為陽性。如陰性對照A值的平均值低于0.08時(shí)按0.08計(jì)算。
【注意事項(xiàng)】
1.試劑盒于2-8℃保存,有效期12個(gè)月。每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。
3.試劑盒中終止液具有腐蝕性,要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊,各瓶蓋之間不可混用。不同批號試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無染菌、無血脂、無溶血的血清。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
6. 37℃孵育時(shí),建議使用水浴箱。如無條件,可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。
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