當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>土壤系列>> AS6321306土壤木質(zhì)素過氧化物酶(SLiP)測試盒
產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 規(guī)格 | 100管/48樣、50管/24樣 |
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級別 | 其他 |
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貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
AS6321306 | 土壤木質(zhì)素過氧化物酶(SLiP)測試盒 | 100管/48樣 |
AS6321306 | 土壤木質(zhì)素過氧化物酶(SLiP)測試盒 | 50管/24樣 |
測定意義
木質(zhì)素過氧化物酶(EC1.11.1.14)是一種含亞鐵血紅素的過氧化物酶,屬于木質(zhì)素降解酶系,在木質(zhì)素生物降解、造紙工業(yè)、紡織工業(yè)、芳香化合物轉(zhuǎn)化與降解及環(huán)境污染控制等方面具有較大的應(yīng)用潛力。
測定原理
木質(zhì)素過氧化物酶氧化藜蘆醇生成藜蘆醛,在310nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)。
試劑組成和配制
試劑一:液體25mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體15mL×1瓶,4℃避光保存。
試劑三:液體10mL×1瓶,4℃保存。
樣品處理
新鮮土樣風(fēng)干,過30-50目篩。
測定操作
對照管 | 測定管 | |
土樣(g) | 0.04 | 0.04 |
甲苯(μL) | 30 | 30 |
25℃靜置15min | ||
試劑一(μL) | 200 | |
蒸餾水(μL) | 200 | |
試劑二(μL) | 120 | 120 |
試劑三(μL) | 80 | 80 |
30℃震蕩反應(yīng)3h,冰浴5min,12000g,4℃離心10min,取上清200μL,于微量石英比色皿/96孔板(UV)板,測定310nm處吸光值,分別記為A對照和A測定,△A=A測定- A對照 |
酶活計算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
酶活性定義:每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。
S-LiP活性(nmol/d /g 土樣)= ×V反總÷W÷T= 344×△A÷W
ε:藜蘆醛摩爾消光系數(shù):9300L/mol/cm;d:比色皿光徑,1cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.4mL; W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,3h
用96孔板測定的計算公式如下
酶活性定義:每克土壤每天氧化1nmol藜蘆醇所需的酶量為一個酶活力單位。
S-LiP活性(nmol/d /g 土樣)= ×V反總÷W÷T= 688×△A÷W
ε:藜蘆醛摩爾消光系數(shù):9300L/mol/cm;d:比色皿光徑,0.5cm;V反總:反應(yīng)總體積,0.4mL; W:樣本質(zhì)量,g;T:反應(yīng)時間,3h
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