Rtrypsin 重組胰蛋白酶 返回列表頁

rTrypsin的應用

• 包括干細胞在內的多種細胞系的細胞解離和增殖

• 疫苗生產加工

• 在細胞固定和分選之前分離切割的細胞•

rTrypsin的優(yōu)點

• 通過重組生產工藝生產的胰蛋白酶不受動物酶如胰凝乳蛋白酶或羧肽酶的污染。

• 無動物來源（AOF）生產工藝消除了最終產品中病毒和動物相關污染物的風險

• 允許簡單替換?；蜇i胰蛋白酶

• 穩(wěn)定性不受Ca2+的影響• 穩(wěn)定一致的供應

rTrypsin穩(wěn)定性

• rTrypsin是一種顆粒狀產品

• rTrypsin的特殊穩(wěn)定性使得在細胞培養(yǎng)過程中酶的儲存和常規(guī)處理變得容易和方便

rTrypsin專一性rTrypsin像天然胰蛋白酶一樣在賴氨酸和精氨酸的羧基側切割肽鍵。這代表rTrypsin可以簡單地替代豬或牛胰蛋白酶rTrypsin 酶特異性在pH 9.0 （Suc-AAPX-pNA）

底物：Suc-AAPA-PNA，Suc-AAPR-PNA，Suc-AAPD-PNA、Suc-AAPIPNA、Suc-aapm-PNA，Suc AAPV-PNA，Suc AAPL-PNA，SucA-APEPNA，SucA-APK-PNA，Suca-AAPF-PNA.

測定緩沖液：100mM琥珀酸，100mM HEPES，100mM CHES，100mMCABS，1mM CaCl2，150mM KCl，0.01%Triton X-100，pH9.0。

測定：20μ 重組胰蛋白酶/豬胰蛋白酶（在0.01%Triton X-100中稀釋）與100μl測定緩沖液在微量滴定板孔中混合。

通過加入100μl PNA底物（50mg PNA底物溶解在1.0ml DMSO中，并進一步用0.01%Triton X-100稀釋45倍）開始測定。監(jiān)測OD405的增加作為胰蛋白酶/豬胰蛋白酶活性的量度

rTrypsin用于分離細胞胰蛋白酶可用于來自粘附于培養(yǎng)容器內表面生長的單層的細胞。rTrypsin在干細胞系如IPH和HES以及CHO、Vero和MDCK細胞系上表現(xiàn)良好。最常見的方法是用胰蛋白酶/EDTA/PBS緩沖液（調節(jié)至pH 7）處理，將細胞從培養(yǎng)基質中去除。根據細胞系的不同，建議的rTrypsin濃度應調節(jié)至0.2 mg/mL（相當于200 U/mL活性為1000 USP/mg粉末的rTrypsin），并進行無菌過濾。